- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y75935
- 国产
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
48
- 英文名：
Diclofensine (Ro 8-4650)
- CAS号：
67165-56-4
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
5mg 10mg 50mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
化学性质:
Diclofensine (Ro 8-4650)规格：5mg 10mg 50mg
CAS：67165-56-4
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C17H17Cl2NO
分子量：322.23
溶解度：Soluble in DMSO
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Diclofensine(Ro-8-4650) is a potent inhibitor of monoamine reuptake, blocking the uptake of dopamine, noradrenaline, and serotonin by rat brain synaptosomes with IC50 values of 0.74, 2.3, and 3.7 nM, respectively.IC50 value:Target: Dopamine reuptake inhibitorThe action of diclofensine on peripheral neuronal adrenergic function was studied through tests of the blood pressure response to NE, tyramine, and phenylephrine (PE). The blood pressure response to NE was enhanced and that to tyramine was decreased by diclofensine, as a result of its inhibitive action on peripheral neuronal amine uptake [2]. Diclofensine, in concentrations of 0.01, 0.1 and 1 microM caused a marked decrease of 3H-DA uptake. In addition, it was unable to stimulate basal endogenous DA release which, on the contrary, was elicited by d-amphetamine in the same concentration (50 microM). On the other hand, diclofensine (50 microM) caused a 3 fold enhancement of K+-evoked DA release [3].[1]. Hyttel J, et al. Neurochemical profile of Lu 19-005, a potent inhibitor of uptake of dopamine, noradrenaline, and serotonin. J Neurochem. 1985 May;44(5):1615-22. [2]. Gasic S, et al. Effect of diclofensine, a novel antidepressant, on peripheral adrenergic function. Clin Pharmacol Ther. 1986 May;39(5):582-5. [3]. Di Renzo G, et al. Pure uptake blockers of dopamine can reduce prolactin secretion: studies with diclofensine. Life Sci. 1988;42(21):2161-9.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
| 产品名称 | Diclofensine (Ro 8-4650) | 产品货号 | CS-01Y75935 |
| 规格 | 5mg 10mg 50mg | CAS号 | 67165-56-4 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C17H17Cl2NO |
| 分子量 | 322.23 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Diclofensine (Ro 8-4650)规格：5mg 10mg 50mg
CAS：67165-56-4
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C17H17Cl2NO
分子量：322.23
溶解度：Soluble in DMSO
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Diclofensine(Ro-8-4650) is a potent inhibitor of monoamine reuptake, blocking the uptake of dopamine, noradrenaline, and serotonin by rat brain synaptosomes with IC50 values of 0.74, 2.3, and 3.7 nM, respectively.IC50 value:Target: Dopamine reuptake inhibitorThe action of diclofensine on peripheral neuronal adrenergic function was studied through tests of the blood pressure response to NE, tyramine, and phenylephrine (PE). The blood pressure response to NE was enhanced and that to tyramine was decreased by diclofensine, as a result of its inhibitive action on peripheral neuronal amine uptake [2]. Diclofensine, in concentrations of 0.01, 0.1 and 1 microM caused a marked decrease of 3H-DA uptake. In addition, it was unable to stimulate basal endogenous DA release which, on the contrary, was elicited by d-amphetamine in the same concentration (50 microM). On the other hand, diclofensine (50 microM) caused a 3 fold enhancement of K+-evoked DA release [3].[1]. Hyttel J, et al. Neurochemical profile of Lu 19-005, a potent inhibitor of uptake of dopamine, noradrenaline, and serotonin. J Neurochem. 1985 May;44(5):1615-22. [2]. Gasic S, et al. Effect of diclofensine, a novel antidepressant, on peripheral adrenergic function. Clin Pharmacol Ther. 1986 May;39(5):582-5. [3]. Di Renzo G, et al. Pure uptake blockers of dopamine can reduce prolactin secretion: studies with diclofensine. Life Sci. 1988;42(21):2161-9.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| H-Chg-OH | MK-4827 Racemate |
| MC3482 | 血管内皮细胞生长因子受2(VEGFR-2/Flk-1)检测试剂盒 |
| (1S,3R,5R)-PIM447 dihydrochloride | 血管内皮细胞生长因子受1(VEGFR1)检测试剂盒 |
| SAR-20347 | 血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)检测试剂盒 |
| WDR5 0103 | 血管内皮细胞生长因子E(VEGF-E)检测试剂盒 |
| Marein | 血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)检测试剂盒 |
| NSC 663284 | 血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)检测试剂盒 |
| 666-15 | Angiotensin converting enzyme, ACE Elisa Kit |
| PFI 4 | 血管内皮细胞生长因子受3(VEGFR-3/Flt-4)检测试剂盒 |
| Olaparib (AZD2281, Ku-0059436) | 血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)检测试剂盒 |
| Bromodomain IN-1 | 血管内皮抑素抗(ES-Ab)检测试剂盒 |
| NSC 87877 | 血管生成素受/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒 |
| PD-166866 | Diclofensine (Ro 8-4650)血管生成素受/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)检测试剂盒 |
| Pregnanediol-3-Glucuronide | 血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)检测试剂盒 |
| 血管生长素(ANG)检测试剂盒 | 血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)检测试剂盒 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验相关实验
CD45/CD45RA/CD45RB/CD45RC/CD45RO
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的产物。这些酸性和酚类物质能结合血清中的钙并改变其浓度，导致错误的结果。 因此，当使用简单的 SDI 水用于供给临床生化仪时，可能会出现上述两个问题： ➤ 钙泄漏，会干扰血钙浓度 ➤ 存在大量有机酸，可通过结合而改变血钙浓度 所以，对于一个成熟的水纯化工艺通常应该包括反渗透（RO）和电去离子（EDI）的组合，RO-EDI 的组合能确保恒定的水质，而不会出现使用 SDI 水时水的离子纯度下降的情况。另外，RO-EDI 能非常有效去除大量有机酸（腐殖酸和富里酸），减少分子与钙的结合。
性T细胞表型的异同点。可以看出，第一，所有的记忆性T细胞(CD4TCM、CD4TEM、CD8TCM和CD8TEM)皆为CD45RO+，但CD8TCM中有一个亚群为CD45RO-CD45RA+，特称为CD8TEMRA。第二，对CCR7和CD62L这两种表面分子，只有TCM为阳性，而TEM为阴性，这也是表9―5所展示的情况。CD27和CD28的表达格局比较复杂，虽主要于表达在TCM，但也有例外。至于其他一些标志的表达格局，则因细胞亚群的不同而呈现变化。 人体记忆
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