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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
40
- 英文名:
N,N-Dipropyldopamine (hydrobromide)
- CAS号:
65273-66-7
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
1mg 5mg 10mg 25mg
| 产品名称 | N,N-Dipropyldopamine (hydrobromide) | 产品货号 | CS-01Y76558 |
| 规格 | 1mg 5mg 10mg 25mg | CAS号 | 65273-66-7 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C14H23NO2.HBr |
| 分子量 | 318.2 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
N,N-Dipropyldopamine (hydrobromide)规格:1mg 5mg 10mg 25mg
CAS:65273-66-7
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C14H23NO2.HBr
分子量:318.2
溶解度:Soluble in DMSO
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
N,N-Dipropyldopamine is a dopamine receptor agonist.1,2,3 It decreases dihydrophenylalanine (DOPA) levels in the limbic forebrain and striatum of reserpinized rats (ED50s = 25 and 20 μmol/kg, respectively), as well as reduces homovanillic acid levels in rat striatum when administered at a dose of 80 μmol/kg.1 N,N-Dipropyldopamine (0.5-16 mg/kg) reduces spontaneous locomotor activity in mice, an effect that can be reversed by the antipsychotic spiroperidol.2,3|1. Wikstr?m, H., Lindberg, P., Martinson, P., et al. Pivaloyl esters of N,N-dialkylated dopamine congeners. Central dopamine-receptor stimulating activity. J. Med. Chem. 21(9), 864-867 (1978).|2. Feenstra, M.G., Rollema, H., Horn, A.S., et al. Effect of dihydroxy-2-aminotetralin derivatives on dopamine metabolism in the rat striatum. Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 310(3), 219-225 (1980).|3. Costall, B., Lim, S.K., and Naylor, R.J. Characterisation of the mechanisms by which purported dopamine agonists reduce spontaneous locomotor activity of mice. Eur. J. Pharmacol. 73(2-3), 175-188 (1981).
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| β-D-Glucosamine Pentaacetate | Columbianadin |
| RRx-001 | 胆酸(CA) 试剂盒 ELISA |
| Bardoxolone methyl | 幽门螺旋IgG(Hp-IgG)ELISA检测试剂盒 |
| MTP 131 (acetate) | 胃粘液素(GM)检测试剂盒 |
| Benastatin A | γ谷氨酰转移酶(GGT) ELISA Kit |
| Costunolide | 透明质酸结合蛋白(HABP)试剂盒 ELISA |
| Matrine | Ⅰ型胶原N末端肽(NTX) ELISA检测试剂盒 |
| F16 | Dachsous 1(DCHS1)ELISA Kit |
| Taurodeoxychloic Acid sodium hydrate | 肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ) 检测试剂盒 |
| Prednisone | 谷氨酸脱氢酶(GDH/GLDH) ELISA Kit |
| Celecoxib-d7 | 胃泌素细胞抗(GCA) ELISA检测试剂盒 |
| α-hederin | 纤维连接素相关抗原(FRA) 试剂盒 ELISA |
| Epirubicin HCl | N,N-Dipropyldopamine (hydrobromide)Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ) 检测试剂盒 |
| Norfluoxetine (hydrochloride) | 乙酰肝素酶(HPA)ELISA Kit |
| 丙氨酸转氨酶/谷丙转氨酶(ALT/GPT) 检测试剂盒 | 肝脂酶(HL)ELISA检测试剂盒 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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