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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
54
- 英文名:
Stiripentol-d9
- CAS号:
1185239-64-8
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
1mg
| 产品名称 | Stiripentol-d9 | 产品货号 | CS-01Y77334 |
| 规格 | 1mg | CAS号 | 1185239-64-8 |
| 含量 | >99.50% | 分子式 | C14H9D9O3 |
| 分子量 | 243.3 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Stiripentol-d9 is intended for use as an internal standard for the quantification of stiripentol by GC- or LC-MS. Stiripentol is a third-generation antiepileptic compound.1 It is a positive allosteric modulator of GABAA receptors, potentiating GABA-mediated activation to a greater extent in receptors expressing α3 subunits and to a lower extent in those containing β1 or ε subunits.2 It also inhibits GABA reuptake in vitro and increases the release of GABA in neonatal rat hippocampal slices.1,3 Stiripentol (500 μM) inhibits lactate dehydrogenase (LDH), blocking both lactate-to-pyruvate and pyruvate-to-lactate conversions by human LDH1 and LDH5.4 Formulations containing stiripentol have been used in the adjunctive treatment of seizures associated with Dravet syndrome.|1. Luszczki, J.J. Third-generation antiepileptic drugs: Mechanisms of action, pharmacokinetics and interactions. Pharmacol. Rep. 61(2), 197-216 (2009).|2. Fisher, J.L. The anti-convulsant stiripentol acts directly on the GABAA receptor as a positive allosteric modulator. Neuropharmacology 56(1), 190-197 (2009).|3. Quilichini, P.P., Chiron, C., Ben-Ari, Y., et al. Stiripentol, a putative antiepileptic drug, enhances the duration of opening of GABAA-receptor channels. Epilepsia 47(4), 704-716 (2006).|4. Sada, N., Lee, S., Katsu, T., et al. Targeting LDH enzymes with a stiripentol analog to treat epilepsy. Science 347(6228), 1362-1367 (2015).
化学性质:
规格:1mg
CAS:1185239-64-8
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C14H9D9O3
分子量:243.3
溶解度:Chloroform: soluble
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Stiripentol-d9实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| 1-Naphthyl acetate | Temiverine hydrochloride |
| (R)-(+)-Tolterodine | 抗甲状腺球蛋白抗(ATGA/TGAB)检测试剂盒 |
| Risperidone-d4 | 促肾上皮质激素释放激素(CRH)试剂盒elisa |
| α-Bungarotoxin | 白三烯B4(LTB4)检测试剂盒 |
| Loxapine-d8 | 促性腺激素释放激素(GnRH)检测试剂盒elisa |
| Anatabine dicitrate | 白血病抑制因子受(LIFR)试剂盒ELISA |
| VCP 171 | 表皮生长因子(EGF)ELISA检测试剂盒 |
| VU 10010 | Torsin 2A(TOR2A)ELISA Kit |
| Donepezil-d7 hydrochloride | 促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA检测试剂盒 |
| 3-hydroxy Octanoic Acid | 乙酰胆碱(Ach)试剂盒ELISA |
| ICI 162,846 | 血栓素B2(TXB2)检测试剂盒 |
| Senktide | 肌红蛋白(MYO/MB)检测试剂盒elisa |
| Neuromedin S (rat) (trifluoroacetate salt) | Stiripentol-d9白介素1β(IL-1β)试剂盒elisa |
| Seviteronel racemate | 白介素1(IL-1)检测试剂盒 |
| 可溶性P选择素(sP-selectin)检测试剂盒 | S100B蛋白(S-100B)ELISA检测试剂盒 |
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文献和实验the addition of deuterated internal standard THC-COOH-d9 into the sample followed by hydrolysis of conjugated THC-COOH by alkali. THC-COOH is extracted from urine or blood using liquid–liquid extraction followed by preparation of its trimethylsilyl derivatives
稀释液的效果更好。4. 匹配的二抗和显色系统——「配一配和滴一滴」使用多聚 HRP(Poly-HRP)的二抗,即在二抗上连接大量 HRP,以充分放大信号;同时,配合优质的色原产品,提升灵敏度,增强信号。注:在人肺癌标本中使用 Sox2(D6D9) XP® RabbitmAb#3579 检测 Sox2 的表达,使用基于多聚-HRP 的 SignalStain® BoostIHCDetectionReagent 的检测灵敏度更高。注:DAB 色原比较:在人乳腺癌组织中使用 p-Stat3(Tyr705)(D
://www5.amershambiosciences.com/aptrix/upp00919.nsf/(FileDownload)?OpenAgent&docid=6EEE47990D9F933EC1256F90000DD697&file=18102218AI.pdf 离子交换层析和聚焦层析的原理和方法(188页) http://www5.amershambiosciences.com/aptrix/upp00919.nsf/(FileDownload)?OpenAgent&docid
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