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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
tetranor-12(S)-HETE
- CAS号:
121842-79-3
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
25μg 50μg 100μg
| 产品名称 | tetranor-12(S)-HETE | 产品货号 | CS-01Y77130 |
| 规格 | 25μg 50μg 100μg | CAS号 | 121842-79-3 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C16H26O3 |
| 分子量 | 266.4 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
tetranor-12(S)-HETE规格:25μg 50μg 100μg
CAS:121842-79-3
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C16H26O3
分子量:266.4
溶解度:0.1 M Na2CO3: 2 mg/ml,DMF: 25 mg/ml,DMSO: 25 mg/ml,Ethanol: 30 mg/ml,PBS (pH 7.2): .5 mg/ml
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
12(S)-HETE is a product of arachidonic acid metabolism through the 12-lipoxygenase pathway. It is primarily found in platelets, leukocytes, and to a lesser extent in smooth muscle cells. It enhances tumor cell adhesion to endothelial cells, fibronectin, and the subendothelial matrix. tetranor-12(S)-HETE is the major β-oxidation product resulting from peroxisomal metabolism of 12(S)-HETE in numerous tissues, and Lewis lung carcinoma cells. No biological function has yet been determined for tetranor-12(S)-HETE. Some data indicate it may play a role in controlling the inflammatory response in injured corneas. In some diseases (e.g., Zellweger's Syndrome) peroxisomal abnormalities result in the inability of cells to metabolize 12(S)-HETE, which may be responsible for symptoms of the disease. The tetranor derivative of 12(S)-HETE is available as a research tool for the elucidation of the metabolic fate of its parent compound.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| TC 1698 dihydrochloride | Boc-Aib-OH |
| Boc-Dap(Z)-OH.DCHA | 磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)检测试剂盒 |
| Z-Asp-OH | 组织蛋白酶K(cath-K)试剂盒ELISA |
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| Boc-Met-OH.DCHA | 视黄醇结合蛋白4(RBP-4)试剂盒elisa |
| H-Ala(3-pyridyl)-OMe.2HCl | 6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)检测试剂盒elisa |
| Z-Thr-NH2 | Aldose Reductase Like Protein 1(ARL1)ELISA Kit |
| Boc-Phe(4-NH2)-OH | 磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)检测试剂盒elisa |
| Z-Prolinol | 胶原酶I(CollagenaseI)试剂盒elisa |
| Fmoc-Cysteinol(Trt) | 髓系细胞触发受-1(TREM-1)检测试剂盒 |
| H-Met-OAll.TosOH | 胶原酶II(CollagenaseII)ELISA检测试剂盒 |
| Fmoc-D-Glu-OtBu | tetranor-12(S)-HETE硫氧化还原蛋白(Trx)试剂盒ELISA |
| Ansatrienin A | 硫氧还蛋白还原酶(TrxR)检测试剂盒 |
| 网膜素(omentin)检测试剂盒 | 蛋白磷酸酶(PP)检测试剂盒elisa |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验也可用辅酶型维生素B 12 、辅酶 B 12 等词来表示。是由 5- 脱氧腺苷基取代氰钴胺素( CN - B 12 )中与钴连接的 CN 基而生成的,所以亦称钴胺酰胺辅酶。其中大多数是核苷酸中的碱基为 5 , 6- 二甲(基)苯并咪唑的二甲(基)苯并咪唑钴酰胺辅酶( dimeth - ylbenzimidazole cobamide coenzyme )和钴胺素辅酶,但也有碱基为腺嘌呤或 5- 羟基苯并咪唑所置换的 B 12 辅酶。 B 12 辅酶是 H.Barker 等在研
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