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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
21
- 英文名:
CR4056
- CAS号:
1004997-71-0
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
1mg 5mg 10mg 50mg 100mg
化学性质:
规格:1mg 5mg 10mg 50mg 100mg
CAS:1004997-71-0
别名:N/A
化学名:N/A
CR4056分子式:C17H12N4
分子量:272.3
溶解度:DMSO : 30 mg/mL (110.17 mM)
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
产品描述:
CR4056 is a selective inhibitor of human recombinant MAO-A with an IC50 of 202.7 nM. CR4056 is also a ligand of imidazoline-2 receptor (I2R) with an IC50 of 596 nM.CR4056 is an imidazoline-2 receptor (I2R) ligand with an IC50 of 596±76 nM. CR4056 is also an inhibitor of both human recombinant MAO-A and MAO-B with IC50s of 202.7±10.3 and >10000, respectively[1]. The co-treatment of bortezomib (BTZ) with CR4056 at all the concentrations used (range 3 to 30 μM) does not induce any significant difference in cell survival compare with BTZ-treated cells, either in H929 or in RPMI 8226 myeloma cells[2].Two hours after a single oral dose of 20 mg/kg CR4056, endogenous norepinephrine (NE) levels increase by 68.2%±14.1% (P<0.05 versus vehicle) in the parieto-occipital cortex. Sub-chronic (four days) oral treatment with 20 mg/kg CR4056 once daily, significantly increases NE levels both in the cerebral cortex (63.1%±4.2%; P<0.05 versus vehicle) and in the lumbar spinal cord (51.3%±6.7%; P<0.05 versus vehicle). CR4056 dose-dependently reduces mechanical hyperalgesia (effective dose [ED50]=5.8 mg/kg) (P<0.001). CR4056 (10 mg/kg) and piroxicam (10 mg/kg) significantly reverse the decrease in withdrawal threshold caused by capsaicin (P<0.001 versus vehicle). The highest tested dose of CR4056 (30 mg/kg) completely reverses the effect of capsaicin, increasing paw withdrawal threshold (PWT) to 239±12 g (P<0.001 versus vehicle) after 1 hour. CR4056 dose-dependently decreases streptozotocin (STZ)-induced diabetic pain in rats (F[4, 35]=31.27, P<0.001). CR4056 significantly increases the mechanical withdrawal thresholds of both ipsilateral (F[4, 30]=19.97, P<0.001) and contralateral (F[4, 30]=31.58, P<0.001) hind paws compare with vehicle control[1].[1]. Ferrari F, et al. Analgesic efficacy of CR4056, a novel imidazoline-2 receptor ligand, in rat models of inflammatory and neuropathic pain. J Pain Res. 2011;4:111-25. [2]. Meregalli C, et al. CR4056, a new analgesic I2 ligand, is highly effective against bortezomib-induced painful neuropathy in rats. J Pain Res. 2012;5:151-67.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
规格:1mg 5mg 10mg 50mg 100mg
CAS:1004997-71-0
别名:N/A
化学名:N/A
CR4056分子式:C17H12N4
分子量:272.3
溶解度:DMSO : 30 mg/mL (110.17 mM)
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
| 产品名称 | CR4056 | 产品货号 | CS-01Y76003 |
| 规格 | 1mg 5mg 10mg 50mg 100mg | CAS号 | 1004997-71-0 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C17H12N4 |
| 分子量 | 272.3 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
CR4056 is a selective inhibitor of human recombinant MAO-A with an IC50 of 202.7 nM. CR4056 is also a ligand of imidazoline-2 receptor (I2R) with an IC50 of 596 nM.CR4056 is an imidazoline-2 receptor (I2R) ligand with an IC50 of 596±76 nM. CR4056 is also an inhibitor of both human recombinant MAO-A and MAO-B with IC50s of 202.7±10.3 and >10000, respectively[1]. The co-treatment of bortezomib (BTZ) with CR4056 at all the concentrations used (range 3 to 30 μM) does not induce any significant difference in cell survival compare with BTZ-treated cells, either in H929 or in RPMI 8226 myeloma cells[2].Two hours after a single oral dose of 20 mg/kg CR4056, endogenous norepinephrine (NE) levels increase by 68.2%±14.1% (P<0.05 versus vehicle) in the parieto-occipital cortex. Sub-chronic (four days) oral treatment with 20 mg/kg CR4056 once daily, significantly increases NE levels both in the cerebral cortex (63.1%±4.2%; P<0.05 versus vehicle) and in the lumbar spinal cord (51.3%±6.7%; P<0.05 versus vehicle). CR4056 dose-dependently reduces mechanical hyperalgesia (effective dose [ED50]=5.8 mg/kg) (P<0.001). CR4056 (10 mg/kg) and piroxicam (10 mg/kg) significantly reverse the decrease in withdrawal threshold caused by capsaicin (P<0.001 versus vehicle). The highest tested dose of CR4056 (30 mg/kg) completely reverses the effect of capsaicin, increasing paw withdrawal threshold (PWT) to 239±12 g (P<0.001 versus vehicle) after 1 hour. CR4056 dose-dependently decreases streptozotocin (STZ)-induced diabetic pain in rats (F[4, 35]=31.27, P<0.001). CR4056 significantly increases the mechanical withdrawal thresholds of both ipsilateral (F[4, 30]=19.97, P<0.001) and contralateral (F[4, 30]=31.58, P<0.001) hind paws compare with vehicle control[1].[1]. Ferrari F, et al. Analgesic efficacy of CR4056, a novel imidazoline-2 receptor ligand, in rat models of inflammatory and neuropathic pain. J Pain Res. 2011;4:111-25. [2]. Meregalli C, et al. CR4056, a new analgesic I2 ligand, is highly effective against bortezomib-induced painful neuropathy in rats. J Pain Res. 2012;5:151-67.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| 2-hydroxy Lignoceric Acid | CC-671 |
| 4-Thiouracil | 维生素B6(VB6)检测试剂盒 |
| 360A | Ⅰ型胶原(ColⅠ)试剂盒ELISA |
| BMS265246 | 可溶性P选择素(sP-selectin)检测试剂盒 |
| AZD4573 | Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA检测试剂盒 |
| 6RK73 | S100蛋白(S-100)试剂盒elisa |
| Halofuginone hydrobromide (RU-19110 (hydrobromide)) | 白介素1(IL-1)检测试剂盒elisa |
| L-755,507 | Neuronal Pentraxin II(NPTX2)ELISA Kit |
| GDC-0575 dihydrochloride (ARRY-575 dihydrochloride) | Ⅱ型胶原(ColⅡ)检测试剂盒elisa |
| Blasticidin S HCl | 维生素C(VC)试剂盒elisa |
| Duocarmycin MA | Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)检测试剂盒 |
| Brefeldin A | 25羟基维生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA检测试剂盒 |
| 4E1RCat | CR4056载脂蛋白B100(apo-B100)试剂盒ELISA |
| Cobicistat (GS-9350) | 载脂蛋白A1(apo-A1)检测试剂盒 |
| 胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)检测试剂盒 | 6酮前列腺素(6-K-PG)检测试剂盒elisa |
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