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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
26
- 英文名:
D-DOPA
- CAS号:
5796-17-8
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
50 mg 100 mg 250 mg 500 mg
规格:50 mg 100 mg 250 mg 500 mg
CAS:5796-17-8
别名:N/A
化学名:N/A
D-DOPA分子式:C9H11NO4
分子量:197.2
溶解度:0.1 M HCl: 10 mg/ml
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
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本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
| 产品名称 | D-DOPA | 产品货号 | CS-01Y76043 |
| 规格 | 50 mg 100 mg 250 mg 500 mg | CAS号 | 5796-17-8 |
| 含量 | >95.00% | 分子式 | C9H11NO4 |
| 分子量 | 197.2 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
D-DOPA is an enantiomer of the dopamine precursor L-DOPA . It can be converted to L-DOPA via sequential oxidation and transamination, which are mediated by D-amino acid oxidase (DAAO) and DOPA transaminase, respectively, in rat kidney homogenates.1 It reduces the number of dopaminergic neurons in primary rat embryonic mesencephalic cultures in a concentration-dependent manner.2 Intraventricular administration of D-DOPA (200 μg/animal) increases striatal dopamine levels in rats.3 D-DOPA (20 mg/kg, i.p.) induces contralateral turns in a rat model of Parkinson's disease induced by 6-OHDA .41.Wu, M., Zhou, X.-J., Konno, R., et al.D-dopa is unidirectionally converted to L-dopa by D-amino acid oxidase, followed by dopa transaminaseClin. Exp. Pharmacol. Physiol.33(11)1042-1046(2006) 2.Ling, Z.-D., Pieri, S.C., and Carvey, P.M.Comparison of the neurotoxicity of dihydroxyphenylalanine stereoisomers in cultured dopamine neuronsClin. Neuropharmacol.19(4)360-365(1996) 3.Karoum, F., Freed, W.J., Chuang, L.-W., et al.D-dopa and L-dopa similarly elevate brain dopamine and produce turning behavior in ratsBrain Res.440(1)190-194(1988) 4.Moses, J., Siddiqui, A., and Silverman, P.B.Sodium benzoate differentially blocks circling induced by D-and L-dopa in the hemi-parkinsonian ratNeurosci. Lett.218(3)145-148(1996)
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| E-5324 | Dihydrostreptomycin sulfate (Dihydrostreptomycin sesquisulfa |
| (±)-Alliin | 胆固醇(CH)检测试剂盒 |
| RPW-24 | 金属硫蛋白2(MT2)试剂盒elisa |
| Lansoprazole | 3-硝基酪氨酸(3-NT)检测试剂盒 |
| BM635 | 可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受1(sLOX-1)检测试剂盒elisa |
| Sorbic acid | 糖胺聚糖(GAG)试剂盒ELISA |
| Thiocillin I | 半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA检测试剂盒 |
| LolCDE-IN-1 | GAL3(Galectin 3)ELISA Kit |
| Sulfamonomethoxine | 载脂蛋白C3(ApoC3)ELISA检测试剂盒 |
| Celgosivir (MBI 3253) | 总胆汁酸(TBA)试剂盒ELISA |
| Acivicin | 胆碱磷酸甘油酯(PC/CPG)检测试剂盒 |
| PGLa TFA | 磷脂酰丝氨酸(PS)检测试剂盒elisa |
| Bellidifolin | D-DOPA前列腺特异性抗原(PSA)试剂盒elisa |
| 3,4-DAA | 游离前列腺特异性抗原(fPSA)检测试剂盒 |
| 乳头状瘤抗IgM(HPV-IgM)检测试剂盒 | 单纯疱疹抗原2(HSV-Ag2)ELISA检测试剂盒 |
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文献和实验体变黑,就是由于氧化的过程而引起的。在动植物组织内产生黑素的过程,首先是酪氨酸由酪氨酸酶( tyrosinase)氧化而形成多巴,进而经过多巴醌( DOPA quinone)进行氧化。在多酚氧化酶为呼吸末端酶的植物体中,多巴可能成为氢的传递体。又在动物体内肾上腺素的生成,包含着有酪氨酸向多巴氧化和多巴脱羧成羟酪胺的过程。
指DNA双链的局部,由具有互补性单链 DNA与之结合所产生的环状结构。当 DNA复制开始,在原来的双链中仅一方被新合成的短 DNA单链被置换的情况下可以见到(为 Displacement loop之简称)。可通过人工使 DNA单链结合来制成此结构。由 RNA单链所产生的类似结构称为 R环。
L-DOPA (L-3,4-Dihydroxyphenylalanine)
The nonprotein amino acid, 3,4-dihydroxyphenylalanine (L -DOPA) (Fig. 1) is present in high concentrations (about 3–6%) in Mucuna spp. The in vitro addition of L -DOPA to the red blood cells from individuals deficient in glucose 6-phosphate
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