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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Mouse ENTPD3 Protein (ECD, His Tag)
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
100 µg/1 mg
| 规格: | 100 µg | 产品价格: | ¥5820.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1 mg | 产品价格: | ¥33640.0 |
蛋白名称:Mouse ENTPD3 Protein (ECD, His Tag)
蛋白构建:A DNA sequence encoding the mouse ENTPD3 (NP_848791.3) (Gln44-Pro485) was expressed with a polyhistidine tag at the C-terminus.
表达宿主:Baculovirus-Insect Cells
蛋白纯度:> 90 % as determined by SDS-PAGE.
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg protein as determined by the LAL method.
预测N端:Gln 44
蛋白分子量:The recombinant mouse ENTPD3 consists of 453 amino acids and predicts a molecular mass of 50.9 kDa. It migrates as an approximately 55.8 kDa band in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:NP_848791.3
蛋白氨基酸序列:Gln44-Pro485
蛋白标签:C-His
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文献和实验QIAgene Expression Kit——再也不为重组蛋白的表达效率发愁 据Protein Database的最新数据表明,目前已知的人类蛋白有35,000种(包括splice variants),大约33%的蛋白正处于研究中,但是只有8%的蛋白能够成功表达。统计数据同时显示,目前克隆,表达,纯化的成功率只维持在54%,74%,59%。所以说,在蛋白表达的漫漫征途中,拿不到想要的蛋白是一件非常普遍的事情。举一个例子来说对于目标蛋白不表达或表达量低这个常见问题,需要排除或检查的因素就太多
,或者可以表达以产生重组蛋白。pET-32α(+)载体系列用于表达与109 aa Trx•Tag™硫氧还蛋白融合的肽序列。它属于一种表达系统,可在其激活后产生所需的蛋白质。插入原核宿主细胞。原核细胞如大肠杆菌因为它们廉价,快速的生物量积累和简单的工艺规模扩大,因此是外源蛋白表达的首选宿主。在本文中,我们将重点总结这种在我们的实验室中使用的有用技术。表达后pET-32α(+)载体的构建,蛋白质表达和蛋白质纯化将在本文中详细描述。获得用于构建载体的外源DNA片段插入载体的DNA通常可以使用聚合酶链式反应(PCR
就在于包含体中带有6 × His标签的蛋白可以在变性剂作用下生成可溶性蛋白,然后用Ni-NTA纯化。如有必要,变性条件下纯化的蛋白可以复性,重新折叠。 尽管如此,很多研究者还是发现纯化过程中的复性比较困难。另一个方法是调整表达环境使生成少量的可溶的天然构象的重组蛋白。即使形成了包含体,一些带6×His标签的蛋白仍可以在胞质中,这些胞质中的可溶性蛋白可以在天然的非变性的条件下被纯化。如果需要更多的可溶性蛋白,诱导后降低培养温度会有所帮助。培养温度常常直接影响蛋白表达水平和可溶性,降低温度可以降低表达
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