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MP
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116981001(1 Rack)
裂解介质B(96深孔板)配有96个1.2 mL的抗压管,每个管内都预分装0.1 mm硅珠。
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文献和实验先说一下啥是CTL,CTL就是细胞毒性 T 细胞(cytotoxic T lymphocyte CTL),一般应用于肿瘤研究领域。 CTL 杀伤靶细胞主要有两种途径:即细胞裂解性杀伤和诱导细胞凋亡 ( Apoptosis)。 前者指 CTL 分泌诸如穿孔素一类的介质损伤靶细胞膜; 后者指 CTL 通过表面 FasL 与靶细胞表面的 Fas 结合,或者通过释放粒酶 B 至靶细胞后诱导靶细胞凋亡 (Apoptosis)。 一般 CTL 杀伤实验步骤有如下几步:1、制备
通常有8、16、32、96通道,相对于抽吸法,磁棒法的优点是每一步的液体不残留,因为磁棒只带走磁珠,转移到下一个步骤相应的反应孔中,另外选择磁棒法的提取仪器最好要功能更齐全的,比如可以加热,每个加热槽最好独立温控,这样可以设置加热、裂解、洗脱的不同温度,另外很重要的一点是,带动磁棒的电机要能带动磁棒进行液体的快速混匀和搅拌,这样才有利于自动化和有助于裂解和漂洗彻底。磁棒法的通量选择最好是32通道,96通道的看似通量更高,但是有个很现实的问题,96个磁力棒在从一个板转移至另外一个板的时候,磁力棒上面
b) 倾斜96孔板,吸干剩余的PBS c) 去离子水将5XPLB稀释成1XPLB,使用前放到常温 d) 每孔加50μL稀释好的 1X PLB,摇床常温条件下摇15min,进行裂解 e) 白色不透光的96孔酶标板中每孔加步骤4的上清液10μL,加入100μL预先混好的LAR II,2s后测数据 f) 每孔添加100μL预先混好的Stop&Glo Reagent,静止2s后,测数据 注意:进行Luciferase活性检测时,需在避光条件
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