磁珠法提取细菌RNA试剂盒

磁珠法提细菌RNA剂盒，使细菌在裂解液(不含Trizol，氯仿等有毒试剂)中裂解完全后，在结合液的作用下，使RNA与磁珠特异性地识别和高效的结合，经漂洗，洗脱后，在外加磁场力的作用下能从样品中分离出RNA，无需添加DNaseI酶就能获得干净的RNA条带。提取的基因组RNA纯度高A260/A280比率介于2.0-2.1之间，基本没有DNA和蛋白质污染，可以应用到各类分子生物学下游实验，适用于革兰氏阴性菌。
优势：
磁珠法提取细菌RNA具有传统柱式法无法比拟的优势。与柱式法相比大大缩短了实验时间，15-20分钟就可提取到条带清晰，浓度高的RNA。具有操作简单，用时短，安全无毒，可完成自动化提取等优势。
操作步骤（仅供参考）：
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。（每瓶需要单独加入30mL无水乙醇）
1.于1.5mLEP管中加入用LB培养过夜的新鲜菌液1mL，12000rpm离心1min，尽量吸除上清。
2.向菌体中加入200μL溶菌酶缓冲液，50μL溶菌酶溶液，移液枪吹吸混匀，室温5min。
3.加入350μL裂解液，移液枪吹吸混匀，室温静置2min。
4.加入600μL无水乙醇，用移液枪吹吸混匀。
5.加入20μL磁珠，涡旋震荡混匀，室温静置5min。将EP管置于磁力架中进行磁分离，待磁珠完全吸附于磁力架后，去除上清，沿管壁尽量将液体吸除干净，注意不要吸到磁珠。
6.加入600μL的漂洗液（使用前请检查是否已加入乙醇），用涡旋振荡器震荡混匀。将离心管放置于磁力架中，待磁珠完全吸附于磁力架后，去除上清，沿管壁尽量将液体吸除干净，注意不要吸到磁珠。
7.重复第6步操作。
8.打开离心管的盖子，于室温中静置干燥1min注意干燥时间不能太久，会使得磁珠上的RNA不易被洗脱。
9.加洗脱液40-100μL，涡旋混匀，室温静置5min，将离心管置于磁力架中，待磁珠完全吸附于磁力架后，用移液枪沿管壁将溶液吸到新的离心管（RNA专用无酶无菌EP管）中，注意不要吸到磁珠，所得溶液即为纯化后的RNA样品，放于-20℃保存。
注意事项：
1.磁珠使用前用涡旋震荡器震荡混匀。
2.磁珠置于4℃冰箱保存。
3.冷冻，干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并影响磁珠表面功能基团的化学活性。
4.样品应避免反复冻融，否则会导致提取量下降。

提取DH5α菌液、BL21菌液、Top10菌液的RNA，进行核酸电泳胶图对比；提取的洗脱体积均为50μL，RNA上样量2-4μL，琼脂糖凝胶浓度为1%，125v 电泳30min。

提取DH5α菌液、BL21菌液、Top10菌液的RNA，浓度及比值结果