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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
Column extraction of Blood RNA kit
- CAS号:
详询
- 保质期:
1 year
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 保存条件:
室温(15℃-25℃)干燥保存
- 规格:
50T
产品简介:
试剂盒采用柱式法来提取全血 RNA,无需使用红细胞裂解液裂解红细胞,操作
简单,无需使用 DNA 酶也可以很好的吸附和去除基因组 DNA,使用本试剂盒提取
的 RNA 无蛋白和其他杂质污染,可用于 RT-PCR、荧光定量 PCR、体外翻译和分子
克隆等多种下游实验。操作简单,用时短。
注意事项:
1.所有相关器皿耗材都应为 RNase-free 产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免
环境中 RNA 酶污染样品。
2.在提取 RNA 的过程中尽量在低温下操作。
3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化,各溶液使用后应及时
盖紧盖子。
4.尽量使用新鲜的血液进行 RNA 的提取。
5.洗脱液的体积不应少于 50μL,体积过少会影响提取效率,RNA 产物应保存在-80℃,
以防 RNA 降解。
6.RNA 浓度及纯度检测:提取的 RNA 片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计
检测纯度与浓度。OD260/OD280 比值应为 2.0-2.2。

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文献和实验Trizol法高产量、快速提取全血基因组DNA一例报道——呵呵
来,如果不剧烈震荡,就可以提出高产量的基因组DNA,虽然有组蛋白污染,不过跑PCR还是不受影响的。除了GADP外,我另外又试过十几种引物,结果都很好。如果用试剂盒提全血DNA,那当然好,前提是你足够有钱。我用酚/氯仿抽提全血DNA,产量一直比较小,试过纯水、RBC裂解液裂解RBC,都不是很理想,WBC损失很大,2ml的产量比不过Trizol法200ul的产量。我最近要摸大量的PCR的条件,所以极郁闷,老是要去提新的对照DNA,烦S了。这次发现了Trizol法的捷径,偶就爽歪了,嘿嘿。此外,常规提取
得到蛋白质图谱[1]: 图 1:从小鼠脾脏和肝脏中使用不同方法提取总蛋白的蛋白图谱 条带 1 为柱式法提取的蛋白样品,条带 2 为 RIPA 可溶组分(RIPA 裂解后的上清),条带 3 为 RIPA 不可溶性组分(丢弃的沉淀部分)。实验发现 RIPA 的不可溶组分蛋白质图谱与可溶性组分图谱相似,但是不完全相同。 丢弃的不可溶组分中仍然可检测到许多蛋白条带,覆盖了整个蛋白质图谱分子量范围,不同样品的不可溶组分图谱也各不相同。丢失的蛋白会引起蛋白图谱发生变化,改变不同种类蛋白的比例,且具有
,不同的裂解液配方溶解效率不同,通常使用的 NP-40、RIPA 等裂解液无法将所有蛋白全部溶出(如图 2),已经有研究发现细胞骨架、细胞外基质蛋白及部分膜蛋白、核蛋白等属于难溶蛋白,在提取过程中会形成不可溶沉淀[3]。如果目的蛋白属于这类难溶蛋白,仅使用可溶性组分(上清)用于 WB 实验时,目的蛋白将无法被检测到。针对这种情况,我们可以选择更加有效的裂解液配方,或者使用柱式蛋白提取法来增溶目的蛋白。例如,使用柱式法总蛋白提取法,可有效溶解难溶蛋白,避免不可溶组分的产生,有效解决蛋白丢失问题









