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Cellworld Hoechst 33342 染色液(1m

g/mL)C0260-117
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  • Cellworld
  • C0260-117
  • 中国 北京
  • 2025年07月14日
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      北京沃比森科技有限公司

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      1ml

    Hoechst 33342 染色液(1mg/mL)
    Hoechst 33342

    Product Number:C0260-117


    产品描述:
    Hoechst 33342/PI 双染试剂盒(Hoechst 33342/PI Double Stain Kit)采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)双染的方法以区分凋亡细胞和坏死细胞的试剂盒。其检测原理是:细胞核荧光染料Hoechst 33342可以穿透细胞膜,嵌入双链DNA后释放蓝色荧光。对于正常细胞,其可少许进入细胞膜使其染上低蓝色。而凋亡细胞由于细胞膜通透性增强,从而使得进入凋亡细胞内的Hoechst 33342明显多于正常细胞,荧光强度比正常细胞要高。另外,细胞发生凋亡时染色质会固缩,从而使得染料能更有效和聚集的结合于DNA,并且凋亡细胞膜上的p-糖蛋白泵功能受损而不能有效的将Hoechst 33342排除到细胞外使其在细胞内的积累增加,这些特征都使得凋亡细胞经染色后荧光会比正常细胞明显增强。但细胞核荧光染料PI不能穿透细胞膜完整的正常细胞或凋亡细胞,即活细胞对PI染料拒染。而对于坏死细胞,其细胞膜的完整性在早期即已丧失,可被PI染色。

    本产品为液体(1X)染色液,已经过 0.1μm过滤,不含细菌、支原体等

    使用说明:
    ※  Hoechst 33342也被称为:bisBenzimide H33342 或者 HOE33342。
    ※  Hoechst 33342 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料产品,对细胞的毒性相对较低。  
    ※  Hoechst 33342 染色经常用在细胞凋亡检测过程中使用,染色后可采用荧光显微镜进行观察或采用流式细胞仪检测。Hoechst 33342 也可用于普通细胞核染色使用或DNA染色过程使用。
    ※  Hoechst 33342 的最大激发波长:346nm,最大发射波长:460nm;Hoechst 33342 和 双链DNA进行结合后的最大激发波长:350nm,最大发射波长:461nm。 
    ※  Hoechst 33342可溶于水,溶解度可以达到 20mg/ml。
    ※  用于细胞核染色过程时,Hoechst 33342的工作浓度是:0.5-10ug/ml。Hoechst 33342 荧光染料能少许进入细胞膜中,使喜宝妈们染上低蓝色,然而 凋亡细胞膜通透性增强,所以进入凋亡细胞的 Hoechst 33342 要比正常细胞的量大,凋亡细胞荧光强度要比正常细胞的高,除此之外,凋亡细胞的染色体DNA 结构发生改变后,使该染料可以更有效的与 DNA 进行结合,且凋亡细胞膜上的 p-糖蛋白泵功能受到损伤后不可以有效的将 Hoechst 33342 排出到细胞外,使之在细胞内积累增加,都会让凋亡细胞的蓝色荧光增强。然而 PI染料 是不能进入到细胞膜完整的正常细胞以及凋亡细胞中,所以活细胞对 PI染料拒染,但坏死细胞由于膜完整性在早期已经被破损,所以是可以被PI染料进行染色的。根据以上特性,用 Hoechst 33342 结合 PI染料对凋亡细胞进行双染色,就可以在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞以及坏死细胞进行区别来。
    ※ 在双变量流式细胞仪散点图上,这三群细胞分别表现为:正常细胞为低蓝色/低红色(Hoechst 33342+/PI+),凋亡细胞为高蓝色/低红色(Hoechst 33342++/PI+),坏死细胞为低蓝色/高红色(Hoechst 33342+/PI++)。


    注意事项:
    1. 实验前需戴好防护眼镜,穿戴防护服和口罩,佩戴手套,避免与皮肤接触。
    2. 实验过程中如遇到有毒或者刺激性物质及有害物质产生,必要时实验操作需要手套箱内完成以免对实验人员造成伤害。
    3. 取样品的移液枪头需及时更换,必要时为避免交叉污染尽可能选择滤芯吸头。
    4. 称量药品时选用称量纸,并无风处取药和称量以免扬撒,试剂的容器使用前务必确保干净,并消毒。
    5. 取药品时尽量采用多个药勺分别使用,使用后清洗干净后,烘干消毒存放。
    6. 实验后产生的废弃物需分类存储,并交于专业生物废气物处理公司处理,以免造成环境污染

    保存条件: -20℃
    规   格:  1mL/支
    有效期: 12个月

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    • Isolation of Resident Cardiac Progenitor Cells by Hoechst 33342 Staining

      of stem cells to efficiently efflux vital dyes such as Hoechst 33342. During fluoresence activated cell sorting (FACS) such Hoechst-extruding cells appear to the side of Hoechst-dye retaining cells and have thus been termed side population (SP) cells

    • Hoechst 33342/PI双染色法

      1.悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml;帖壁生长的细胞用含有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化成单细胞悬液,离心,弃上清,用1ml全培养液重悬细胞,加入Heochst 33342,终浓度为1μg/ml,37℃孵育7~10min。 2.4℃ 500~1000r/min离心弃去染液。 3.加入1.0ml PI染液,4℃避光染色15min。 4.400目的筛网过滤1次。 5.流式细胞仪分析。  

    • Hoechst染色的讨论

      %乙醇中浸泡5分钟或更长时间,无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍,再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内,种入细胞培养过夜,使约为50%-80%满。B. 刺激细胞发生凋亡后,吸尽培养液,加入0.5ml固定液,固定10分钟或更长时间(可4℃过夜)。C. 去固定液,用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟,吸尽液体。洗涤时宜用摇床,或手动晃动数次。D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分钟。也宜用摇床,或手动晃动数次。E. 用PBS

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