- ￥999
- 碧云天（beyotime）
- 国产
- L13695
- 2025年09月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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零下20℃
- 保质期：
至少一年有效
- 库存：
现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
5µg
pLenti-SPATA13-sgRNA (SPATA13基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因，或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性，全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除，以及通过puromycin筛选稳定细胞株；也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装，然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得，sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时，建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的SPATA13基因敲除的质粒(L13695 pLenti-SPATA13-sgRNA)、慢病毒(L13696 SPATA13 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L13697 SPATA13 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L13698 SPATA13 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L13699 SPATA13 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品，具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
SPATA13基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | SPATA13 | 221178 | BC109291 | NM_153023 |
| About the gene | |
| Official Symbol | SPATA13 |
| Previous Symbol | - |
| Official Full Name | spermatogenesis associated 13 |
| Synonyms | FLJ31208; ARHGEF29 |
| Location | 13q12.12 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | Q96N96 |
| Pathway/Library | Lung Cancer Growth Related Genes Library |
| Gene Summary | Acts as guanine nucleotide exchange factor (GEF) for RHOA, RAC1 and CDC42 GTPases. Regulates cell migration and adhesion assembly and disassembly through a RAC1, PI3K, RHOA and AKT1-dependent mechanism. Increases both RAC1 and CDC42 activity, but decreases the amount of active RHOA. Required for MMP9 up-regulation via the JNK signaling pathway in colorectal tumor cells. Involved in tumor angiogenesis and may play a role in intestinal adenoma formation and tumor progression. SPT13_HUMAN,Q96N96 |
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文献和实验CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
前期记录先确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因然后对目的基因进行背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- 目标基因背景调查设计 sgRNA 及引物CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计好之后对前期文章的补充：设计 sgRNA 之后，需要对结果进行判断：但为什么 0.7044 分数的哪一个没有选，我也不知道为什么，总感觉他们的顺序不是随意的排的。或许有人能解答一下为什么。顺手把设计工具的解说放上
最近 CRISPR/Cas9 基因敲除技术可谓风靡全世界的实验室，CRISPR 被称为规律成簇间隔短回文重复，其实际上就是一种基因编辑器，是细菌用以保护自身对抗病毒的一个系统。后来，研究人员发现，它似乎是一种精确的万能基因武器，可以用来删除、添加、激活或抑制其他生物体的目标基因。由于其相对于前几代基因敲除技术而言更为简便高效。所以一经问世便受到科研界的热捧。利用 Cas9 质粒建立 knock-out 细胞系实验过程主要有以下几步：1. 确定待敲除基因的靶位点；2. 设计识别靶位点识别的一对
和RecBCD蛋白组成，在基因敲除时必须以环状质粒存在）、结合转化敲除系统及温度敏感型质粒敲除系统等可供选择。 2 FLP-FRT系统和Cre-loxP系统 这两个系统都是位点特异性重组酶系统，其中FLP-FRT源于酿酒酵母，Cre-loxP源于F1噬菌体。两个系统的基本原理类似。以Cre-loxP系统为例，该系统含有两种成分：第一个部分是一段长34 bp的重组酶识别的DNA序列（loxP），其中含有两个13 bp的反向重复序列和一个8 bp的核心序列；第二个是Cre
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