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- Meridian
- MDX054
- 德国
- 2026年01月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
9999
- 英文名：
Uracil DNA Glycosylase
- 保质期：
24个月
- 供应商：
北京迈迪安生物科技
- 保存条件：
在 -20°C 下长期保存。分装以避免多次冻融循环
尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDG) 是一种用于消除 qPCR 和 RT-qPCR 中残留的聚合酶链式反应 (PCR) 产物的酶。这是通过在所有 qPCR 产物中加入 dUTP 来实现的，因此之前 PCR 扩增的任何残留产物都将含有 dU，可以通过用 UDG 酶预处理来消化。
Meridian 尿嘧啶 DNA 糖基化酶
描述
尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDG) 可催化尿嘧啶从含尿嘧啶的单链或双链 DNA 中释放，但不催化 RNA 或寡核苷酸（6 个或更少碱基）中释放。UDG 在很宽的 pH 范围内均有活性，最佳 pH 值为 8.0，不需要二价阳离子，且受高离子强度（>200 mM）抑制。
规格
| 描述 | 尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDG) 可从单链和双链 DNA 的糖部分中去除尿嘧啶残基，而不会破坏磷酸二酯骨架，从而阻止其用作杂交靶标或 DNA 聚合酶的模板。UDG 不会从 RNA 中去除尿嘧啶。 |
| 专注 | 尿嘧啶 DNA 糖基化酶，MDX054 = 1 U/µL，50% 甘油溶液 |
| 单位定义 | 一个单位是每分钟催化双链含尿嘧啶 DNA 释放 60 pmol 尿嘧啶的酶量。活性通过 37 °C 下 30 分钟内含有 0.2 mg DNA (104-105 cpm/mg) 的 50 µL 反应混合物中 [3H]-尿嘧啶的释放来测量。 |
| 来源 | MDX054是携带过表达的尿嘧啶DNA糖基化酶修饰基因的 重组大肠杆菌菌株。 |
| 格式 | 澄清无色溶液 |
| 10x 反应缓冲液 | 0.25 M Tris-Cl、1 mM EDTA、10 mM DTT、pH 8.0。 |
| 应用 | 高通量、PCR、qPCR |
| 样品类型 | cDNA、DNA |
| 贮存 | -20 摄氏度 |
| 混合稳定性 | 见外标签 |
| 功能 | 加入 UDGase 后，dUTP PCR 产物发生降解，在琼脂糖凝胶上形成单一、清晰的条带。 |
| DNA污染 | PCR 扩增中未检测到任何痕迹，与大肠杆菌和小鼠基因组 DNA 特定目标的阴性对照有重叠。 |
| DNase 污染 | 没有可检测到的降解 |
常规型UDG:
来源：携带大肠杆菌的UDG基因的大肠杆菌菌株，较为耐热。
反应温度：37°C孵育10分以去除含dU的PCR产物气溶胶污染
灭活：95℃ 10分钟可灭活（丧失~95%酶活性），但有可能仍会残留有少量活性，导致含有dU碱基的PCR产物
迈迪安近期全新推出无甘油UDG高浓度酶，可兼容冻干体系，开发常温稳定的检测：
| 产品货号 | 产品名称 | 规格 |
| MDX054 | UDG酶 | 10mL(10,000 units) |
| MDX216 | 无甘油UDG酶 (HC) | 20μL (1000 units) |
热敏性UDG:
来源：携带嗜冷海洋细菌克隆的UDG基因的大肠杆菌菌株，又称南极热敏UDG
反应温度：常温（~25℃）孵育5-10分钟去除含dU的PCR产物气溶胶污染
灭活：50℃ 5分钟即完全失活，可以避免了常规UDG失活后可能存在的残留活性
迈迪安近期也推出全新的无甘油热敏型UDG高浓度酶，可兼容冻干体系，开发常温稳定的检测：
| 产品货号 | 产品名称 | 规格 |
| MDX217 | 无甘油热敏UDG酶（HC） | 20μL (1000 units) |
迈迪安dUTP防污染qPCR体系
除了以上两款单独的UDG酶以外，迈迪安还提供一系列含有dUTP的qPCR预混液，这些预混液含有优化比例的dTTP和dUTP，搭配UDG酶使用，即可以用于开发防污染体系的qPCR反应。这一系列预混液含有通用的液体体系，也含有无甘油可冻干的体系，可用于开发常温稳定的检测：
| 产品货号 | 产品名称 | 应用 |
| MDX031 | 高通量dUTP qPCR预混液 | qPCR,高通量检测 |
| MDX093 | 高通量dUTP RT-qPCR预混液 | RT-qPCR,高通量检测 |
| MDX025 | Low LOD 一步法RT-qPCR预混液 | RT-qPCR |
| MDX113 | 可冻干dUTP一步法RT-qPCR预混液 | RT-qPCR |
| MDX322 | 可冻干dUTP血液直扩qPCR预混液* | qPCR,血液样本 |
| MDX332 | 可冻干dUTP唾液直扩qPCR预混液* | qPCR,唾液样本 |
| MDX342 | 可冻干dUTP粪便直扩qPCR预混液* | qPCR,粪便样本 |
| MDX352 | 可冻干dUTP尿液直扩qPCR预混液* | qPCR,尿液样本 |
* 也有RT-qPCR单管预混液版本，请联系我们咨询
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文献和实验」和「扩增区」分割开 PCR 体系配置和 PCR 扩增实验。如果不具备这样的条件，首先要避免荧光定量 PCR 实验结束之后开盖，以防扩增产物形成气溶胶对后续实验造成污染。少量意外开盖不能避免时，可以使用含有 UNG 酶（uracil-N-glycoslyase, 尿嘧啶 DNA 糖基化酶）的扩增预混液。如果在 PCR 反应中以 dUTP 代替 dTTP 参入到 PCR 产物中，形成了含有 dUTP 的扩增产物，UNG 酶能选择性断裂单链和双链 DNA 中 U 碱基的糖苷键， 降解 PCR 扩增
真爱满行囊 我最近在体外细胞做的关于gsk3-beta功能问题，发现药物处理以后，gsk-3-beta的总表达量下调，如果是这样的话 1、我是否能够得出gsk-3-beta的活性下调的结论？ 2、是否还有必要做非活性形式的表达量？我的理解是，基础状态下，gsk-3beta维持的是低活性状态，如果总量都下调了，那应该能够得出活性降低的结论了吧？ 3、另外，在这种情况下我是否有必要去做gsk-3-beta的216位点的活性形式的表达
而把各种成分释放出来并混合在一起。象手动热启动方法一样，蜡防护层法比较烦琐，易于污染，不适用于于高通量应用。 三、促进PCR 的添加剂 退火温度，引物设计和镁离子浓度的优化足以对大多数模板进行高特异性的扩增，但是，某些模板，包括高GC 含量的模板，需要其他的措施。影响DNA 熔解温度的添加剂提供了提高产物特异性和产量的另外一种方法。为获得最好的结果需要模板的完全变性。另外，二级结构会阻止引物结合和酶的延伸。PCR 添加剂，包括甲酰胺，DMSO，甘油，甜菜碱以及PCRx Enhancer
