pGLuc-Dura-SV40-C (报告基因质粒)

产品简介：
pGLuc-Dura-SV40-C (报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中进行分泌型、高稳定性、非ATP依赖的Gaussia-Dura Luciferase (Gluc-Dura)萤光素酶报告基因检测的质粒，主要用于在其多克隆位点插入感兴趣的3'-UTR、启动子或增强子等调控元件以研究该调控序列的基因转录调控活性，可用作萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测时的内参。可以使用BglII和多克隆位点切除SV40 early enhancer/promoter，以降低本底性的转录，并插入感兴趣的3'-UTR等调控元件研究该调控序列的基因转录调控活性。研究5'-UTR并希望使用Gaussia Luciferase萤光素酶时，推荐使用pGLuc-Dura-SV40-N (D2764)。

Gaussia Luciferase是分离于夏威夷水域的一种大型海洋桡脚类(Copepod)动物(Gaussia princeps)的新型萤光素酶。Gaussia Luciferase为单条肽链的单体酶，其分子量较小(20kD)，且具有分泌性信号肽，可通过内质网分泌到细胞外。因此在使用Gaussia Luciferase的报告基因载体转染哺乳动物细胞进行表达时，无需裂解细胞，可直接使用细胞培养基上清进行萤光素酶活性的实时检测(当然也可以进行细胞裂解以分析细胞裂解中的萤光素酶活性)。

Gaussia Luciferase萤光素酶催化底物腔肠素的氧化反应并且发光(480nm)。与其他萤光素酶相比，使用Gaussia Luciferase作为报告基因有更多的优势：分泌型萤光素酶，可直接取上清检测，无须裂解细胞；发光强度高，是其它萤光素酶的1000倍；反应无须ATP，不受ATP影响；稳定性高，对温度、pH值等耐受性强。

与野生型Gaussia Luciferase相比，突变型Gaussia-Dura Luciferase在哺乳动物细胞中进行表达时，不仅保留了Gaussia Luciferase的优势和特点，还具有更高的蛋白表达水平和更好的萤光稳定性。

pGLuc-Dura-SV40-C质粒含有SV40早期增强子和启动子，可以实现Gaussia-Dura Luciferase萤光素酶在哺乳动物细胞内的高效表达。

本质粒为氨苄青霉素抗性。

萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。

pGLuc-Dura-SV40-C质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
SV40 early enhancer/promoter	7-418
Gluc (MT) reporter gene	432-989
Multiple cloning site	990-1060
SV40 late polyadenylation signal	1130-1291
β-lactamase (Ampr) coding region	1438-2298

pGLuc-Dura-SV40-C质粒(3124bp)的图谱如下：

pGLuc-Dura-SV40-C的多克隆位点的详细图谱见说明书

pGLuc-Dura-SV40-C中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pGLuc-Dura-SV40-C)包括：

AatII	AfeI	AflII	AgeI	AleI	AscI	AsiSI
BaeI	BbvCI	BclI	BlpI	BmgBI	Bpu10I	BsaAI
BsiWI	BsmBI	BspEI	BspQI	BsrGI	BssHII	BstBI
BstEII	BstXI	BstZ17I	Bsu36I	CspCI	DraIII	EcoNI
Esp3I	FseI	KasI	NaeI	NarI	NdeI	NgoMIV
PacI	PciI	PflFI	PflMI	PluTI	PmeI	PmlI
PpuMI	PshAI	PstI	RsrII	SapI	SbfI	SfoI
SgrAI	SmaI	SnaBI	SrfI	SwaI	TspMI	Tth111I
XcmI	XmaI	ZraI

pGLuc-Dura-SV40-C中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pGLuc-Dura-SV40-C)包括：

Acc65I	G`GTAC,C	54	HindIII	A`AGCT,T	1009
AflIII	A`CRYG,T	1003	HpaI	GTT|AAC	1200
ApaI	G,GGCC`C	1043	KpnI	G,GTAC`C	54
AseI	AT`TA,AT	2050	MfeI	C`AATT,G	1209
AvaI	C`YCGR,G	990	MluI	A`CGCG,T	1003
AvrII	C`CTAG,G	404	MscI	TGG|CCA	525
BamHI	G`GATC,C	1302	NheI	G`CTAG,C	422
BbsI	GAAGACNN`NNNN,	508	NotI	GC`GGCC,GC	1058
BfuAI	ACCTGCNNNN`NNNN,	904	NruI	TCG|CGA	537
BglII	A`GATC,T	1	PaeR7I	C`TCGA,G	990
BmtI	G,CTAG`C	422	PsiI	TTA|TAA	1180
BsaHI	GR`CG,YC	1685	PspOMI	G`GGCC,C	1038
BsaI	GGTCTCN`NNNN,	2159	PspXI	VC`TCGA,GB	990
BsaXI	,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN`	424	PvuII	CAG|CTG	80
BsoBI	C`YCGR,G	990	SacI	G,AGCT`C	1001
BspDI	AT`CG,AT	1295	SacII	CC,GC`GG	561
BspMI	ACCTGCNNNN`NNNN,	904	ScaI	AGT|ACT	1744
ClaI	AT`CG,AT	1295	SexAI	A`CCWGG,T	171
DrdI	GACNN,NN`NNGTC	3009	SfiI	GGCCN,NNN`NGGCC	354
EagI	C`GGCC,G	1057	SpeI	A`CTAG,T	1033
EarI	CTCTTCN`NNN,	1426	SspI	AAT|ATT	1420
Eco53kI	GAG|CTC	998	StuI	AGG|CCT	403
EcoO10I	RG`GNC,CY	1039	TfiI	G`AWT,C	782
EcoRI	G`AATT,C	1015	XbaI	T`CTAG,A	1045
EcoRV	GAT|ATC	1023	XhoI	C`TCGA,G	991
HaeII	R,GCGC`Y	2869

pGLuc-Dura-SV40-C质粒可使用的测序引物序列如下：

Feverse primer (891-911): 5´TCT GAC CTG CTC AAG AAG TGG3´

pGLuc-Dura-SV40-C的全序列信息：D2770 pGLuc-Dura-SV40-C (报告基因质粒).txt。

保存条件：

-20℃保存。

注意事项：

本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。