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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存:
205
- 英文名:
HL-60-LUC细胞
- 生长状态:
悬浮生长
- 运输方式:
快递运输
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 物种来源:
人
- 组织来源:
外周血;早幼粒细胞
- 规格:
1x10⁶cells/T25或1mL冻存管
| 一、基本信息 |
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| 细胞名称 |
|
| 细胞规格 |
1x10⁶cells/T25培养瓶或者1mL冻存管 |
| 种属来源 |
人 |
| 组织来源 |
外周血;早幼粒细胞 |
| 细胞形态 |
淋巴母细胞样 |
| 细胞简介 |
Luciferase HL-60细胞稳定表达萤火虫荧光素酶。该细胞株性状稳定,培养时不需要添加抗生素维持。可用作萤火虫荧光素酶活性检测中的阳性对照,也可用于活体动物成像实验。该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。HL-60是一株早幼粒细胞。外周血白细胞来自一位患有急性粒-单核细胞白血病的36岁白人女性。 HL-60 自发分化,丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、视黄酸可以促进分化。细胞表现出吞噬活性,并对趋化刺激有响应。致癌基因myc表达阳性。 |
| puro药筛浓度 |
HL-60-LUC细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml,培养过程中可不用再添加puro,如若担心抗性随着传代时间降低,可定期用0.2ug/ml浓度puro维持 |
| 生物安全等级 |
1 |
| 细胞代数 |
10代以内 |
| 保藏机构 |
ATCC; CCL-240 BCRC; 60027 BCRJ; 0104 DSMZ; ACC-3 ECACC; 98070106 |
| 生长特性 |
悬浮生长 |
| 生长条件 |
气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
| 培 养 基 |
80%IMDM+20%FBS +PS |
| 冻存条件 |
无血清冻存液,液氮储存 |
| 细胞货期 |
现货,1周左右 |
| 供应范围 |
仅用于科研使用,不得用于其它用途 |
| 二、细胞培养操作 |
|
| T25瓶 |
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| 收货处理 |
观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态 |
| 传代密度 |
细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养 |
| 传代比例 |
首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 |
| 传代方法 |
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。 c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。 |
| 注意事项 |
1. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 2. 因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。 |
| 冻存管 |
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| 收货处理 |
到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏 |
| 传代密度 |
第二天换液并检查细胞密度 |
| 传代比例 |
一管细胞建议接种到10cm培养皿或者T25瓶 |
| 传代方法 |
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)第二天换液并检查细胞密度。 |
| 注意事项 |
1. 收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存。 2. 为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。 |
| 三、细胞冻存操作 |
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| 冻存液配方 |
无血清冻存液,液氮储存 |
| 细胞密度 |
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例 |
| 冻存方法 |
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。 b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 注意事项 |
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案 |
| 四、售后服务 |
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| 细胞予重发 |
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。 2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。 3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。 4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。 5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。 6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。 |
| 细胞不重发 |
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。 2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。 3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。 4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。 5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。 6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。 |

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文献和实验iodide (P1304, P3566, P21493). The image was acquired using bandpass filters appropriate for fluorescein. Jurkat 人类白血病T细胞经1微升喜树碱处理,ps外翻,早期凋亡特异性的特征被annexin-5检测到。晚期凋亡和坏死细胞被pi染色。本图是由相应的荧光滤光片获取的。 HL-60 cells treated with camptothecin for three hours
量筛选。自从20多年前,Marlene DeLuca's第一个成功的获得表达萤火虫荧光素酶基因(luc基因)的转基因烟草以来,生物发光的应用进入了一个新时代。生物发光和化学发光(BL/CL)的主要特点就在于发光信号的高度可测性,可以用PMT(光电倍增管)和CCD成像系统来检测极少量的光子信号。BL是属于CL范畴之内,CL反应的特点是高光子产生效率,BL为05-0.8 ,CL为0.1-0.001。因此BL/CL的检测极限可以达到10-18到10-21摩尔,这显然要比其它的光学技术强的多。BL/CL已经
and fluorochromes staining. Chin J Physiol. 1998 Jun 30;41(2):121-6. 中华血液学杂志 1998年 第1期 No.1 JANUARY 1998 细胞凋亡与肿瘤的发生和治疗之间的关系是近年来国际上研究的热点,目前细胞凋亡的检测方法有DNA凝胶电泳法、电子显微镜法、染料透过法、TUNEL法和流式细胞仪法等。我们用染料透过检测法[1]测定阿糖胞苷(Ara-C)诱导的HL-60细胞凋亡,取得了满意的结果,现报道如下。 材料和方法 1.原理 吖啶
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