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-20°-20°
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1-3年
- 库存:
999
- 供应商:
亦高生物
- CAS号:
9001-99-4
- 规格:
R4875-100MG

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文献和实验。在所有各种可能的单碱基错配中,大约50%可用此法确定。 制备不含DNA酶的核糖核酸酶 将胰核糖核酸酶 (RNaseA)溶解在0.01 moI/L醋酸钠(pH5.2)中,使终浓度为10 mg/m[,加热到100oC,15min,在室温下缓慢冷却。用0.1体积的1M的Tris-C1调整pH至7.4后,分装小管保存在—20C备用。当浓缩的溶液在中性pH条件下加热到100C时,核糖核酸酶产生沉淀。
如将活细胞与一定浓度的胰蛋白酶和核糖核酸酶温育,短时间内对细胞的形态、功能和活力几乎没有影响, 但坏死细胞以及细胞浆膜受到损伤的晚期凋亡细胞则可被这两种酶降解,使用流式细胞仪分析,可通过提高光散射、核酸或蛋白质荧光信号的阈值排除晚期凋亡细胞和坏死细胞,测定早期凋亡细胞。 【材料与试剂】 (1) 含Ca2+ 和Mg2+ 的Hanks平衡盐溶液(HBSS):取1份A液(160g NaCl,8g KCl,2g MgSO4 ?7H2 O,2g MgCl2 ●6H2 O,2.8g CaCl
A和0.4 ul 10 u/ul 核糖核酸酶T1。 孵育,30℃,45分钟至1小时。 五、蛋白酶K 向每个样品中添加20%SDS和2.5 ul 的10 mg/ml 的蛋白酶K孵育,37℃ 10 μl 的15-20分钟。 六:清理 提取一次400 ul 酚/氯仿/异戊醇(25:24:1) 将上清转移到新的试管中。加入1000 ul 的100%乙醇和1 μl 为10 mg/ml 的糖原。拌匀。 在-70℃,30分钟或在干冰/ ETOH浴中10分钟孵育样品。 旋转的离心15分钟
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