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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
30ml/200ml/250ml
| 规格: | 30ml | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 200ml | 产品价格: | ¥200.0 |
| 规格: | 250ml | 产品价格: | ¥400.0 |
【产品名称】 通用名称:脱蜡修复二合一溶液 20X pH6.0
【包装规格】 100mL 250mL
【预期用途】 细胞或组织用duojujiaquan、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之 间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色 信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。本抗原修复液可以有效去 除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中 的抗原表位,从而更好地改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行 抗原修复处理,而冰冻切片不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改 善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资 料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以 考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片 等,只要是用duojujiaquan、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原 修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改 善免疫染色效果。本产品适用于石蜡切片,也可以用于冰冻切片等其 它样品。
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文献和实验。 1)高压热修复 切片脱蜡至水。将1500ml~3000ml的0.01M枸橼酸钠缓冲溶液(pH6.0,工作液)或0.001M EDTA(pH8.0)注入不锈钢压力锅中加热至沸腾。切片置于金属架上,放入锅内,使切片位于液面以下,盖锅压阀。当压力锅开始慢慢喷气时(约加热5~6分钟后),计时1~2分钟,然后将压力锅端离热源,冷水冲至室温后,取下气阀,打开锅盖,取出切片,蒸馏水洗后,PBS洗2分钟×3,下接免疫组化染色步骤。 2)煮沸热修复 切片脱蜡至水后,放入盛有 0.01M 枸橼酸钠缓冲溶液(pH6
实验流程:多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上,随后即可衔接下一轮单标染色,直至全部标记完成,即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合:1)新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2)梯度乙醇浸片,100% 5min;95% 5min;70% 2min。3)灭菌水洗片1min,重复3次。4)10%中性福尔马林浸片10min,灭菌水洗片1min,重复3次。2.微波修复:1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中,用抗原修复
5、切片在缓冲液或修复液中浸泡时间太长(大于 24 h):原因上不清楚,但现象存在。有的实验室喜欢前一天将切片脱蜡至修复,第二天加抗体进行免疫组化染色,如果将装有切片和修复液的容器放在 4ºC 冰箱过夜,对结果无明显影响,如果放在室温,特别是炎热的夏天,会出现背景着色,因此,不可存放时间太长。 6、一抗变质、质量差的多克隆抗体:注意抗体的有效期,过期的抗体要么不显色要么背景着色。用新买的抗体时最好设立阳性对照和用使用过的抗体作比较。
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