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德国NanoTemper
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1. 致电厂家时，请您告知参与丁香通大促活动
2. 活动期间，凡被判定为有真实采购需求的的仪器咨询者可获赠咖啡券一张，每个单位仅限一个名额
[ 全面表征蛋白质构象、胶体和化学稳定性 ]
产品简介：
Prometheus Panta蛋白稳定性分析仪可搭载微量差示扫描荧光nanoDSF ( nano Differential Scanning Fluorimetry）技术、动态光散射DLS ( Dynamic Light Scattering )技术、静态光散射SLS ( Static Light Scattering ) 技术以及背反射（ Backreflection ）技术模块，首次实现在整个热升温过程中，【同时且实时地】检测样品构象、粒径和聚集变化，实现对生物制品进行高分辨率、多维度的稳定性表征，监测整个生物制品研发和生产流程中的关键环节，加速生物药开发进程。
技术原理
PR Panta 可搭载四项技术模块，使您深入洞察目标样本。
- 差示扫描荧光 (nanoDSF)：无标记测量热稳定性或化学稳定性
- 动态光散射 (DLS)：测量样品中分子的大小分布
- 静态光散射 (SLS)：关联散射强度与粒子分子量
- 背反射 (Backreflection)：检测聚集状态
产品优势：
• 四大技术模块：可灵活升级，可同时开启
• 无需标记样品：利用蛋白质内源荧光检测，无需添加染料，可进行无标记Thermal Shift Assay
• 操作简便：仅需 10μL 样品，通过毛细作用加载样本，一“吸”一“放”即检测
• 可升级自动化机械臂，实现全自动无人值守
• 兼容去垢剂，可检测高粘度样品
• 无液流系统，免维护
应用领域：
- 治疗药物筛选：生物制剂可开发性评估
- 生物制品稳定性：提供结构域稳定性的全新视角
- 基因治疗：AAV血清型鉴定，衣壳蛋白稳定性表征，载体纯度测定
- 结构生物学：Cryo-EM样本质控
[ 解决DSC技术痛点 - 无标记的TSA验证方法] ：nanoDSF技术不仅仅具有与DSC的一致性精确数据，还弥补了DSC在浓度与检测通量上的缺陷。
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文献和实验又一篇nature！Panta助力精子特异性溶质载体SLC9C1的结构解析
01 研究背景
SLC9C1是精子中特异的溶质载体，属于阳离子/质子逆向转运蛋白SLC9超家族，其表达与精子数量和活力直接相关。SLC9C1包含运输结构域(TD)，电压感应结构域 (VSD)和环核苷酸结合结构域 (CNBD)。VSD感知的膜电压如何激活转运体中的离子交换机制一直不清楚。
来自海德堡大学的Cristina Paulino课题组在Nature上发表了题为“Structures of a sperm-specific solute carrier gated by voltage and cAMP”的文章，解析海胆SLC9C1的结构，并揭示了三个功能域是如何耦合。文中使用NanoTemper Panta分析配体对SLC9C1的构象的影响。
02 案例解读
SpSLC9C1以同二聚体的形式组装，通过结构解析，作者明确识别SpSLC9C1不同的结构域：TD、VSD和CTD（包括CNBS和CH1-9）。
图1：SpSLC9C1在序列水平上的结构域排列
环核苷酸可以使得SLC9C1在静息电位激活，cAMP的激活效果比cGMP高。
作者又解析了SLC9C1在cAMP与cGMP存在的情况下的结构（图2A）。发现结合cAMP的SLC9C1结构有很高的构象异质性，特别是CTD。分析发现cAMP破坏了β-CTD之间的二聚体相互作用，导致CTD偏离对称轴。为了进一步表征cGMP和cAMP结合对SpSLC9C1的影响，作者分析分离的CTD (S946-E1193， CNBD和β-CTD) 在加入cAMP和cGMP后Tm的变化。从结构信息来看，cGMP的加入未引起SLC9C1构象上明显改变，对应的ΔTm变化可能很小。因此，需要一种高精度和重复性的方法进行检测。
nanoDSF技术检测Tm精度为±0.1℃，避免重复性差造成的假阴性问题。实验时，无需加入染料，也不存在染料分子造成的不兼容或者对蛋白的其他影响。nanoDSF检测显示，环核苷酸诱导CTD的热稳定性增加，其中cAMP产生6°C的位移，而cGMP仅观察到2°C，结果证实了cAMP对SpSLC9C1有较高的增强作用。
图2：
A.加入cGMP和cAMP后SpSLC9C1 -CTD结构；
B.Panta nanoDSF模块检测SpSLC9C1 -CTD(蓝色)以及加入cGMP(紫色)和cAMP(橙色)后Tm
综上，cAMP结合在CNBD结构域后也可以破坏β-CTD的相互作用，使其可以在更接近静息电位下被激活，进而进行钠/氢交换，揭示了SLC9C1电压调节与cAMP调节的钠/氢交换机制。
03 产品技术优势
Panta nanoDSF模块具有极高数据重复性和准确性，确保您获得准确的Tm值。实验时无需加入染料，操作简单的同时，保证了实验结果。
此外，Panta整合了DLS、SLS、背反射和nanoDSF四大检测模块，只需一份样品，便可以获得多种稳定性参数。
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