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- 碧云天（beyotime）
- 国产
- L02645
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
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零下20℃
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至少一年有效
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现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
5µg
pLenti-METTL3-sgRNA (METTL3基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因，或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性，全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除，以及通过puromycin筛选稳定细胞株；也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装，然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得，sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时，建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的METTL3基因敲除的质粒(L02645 pLenti-METTL3-sgRNA)、慢病毒(L02646 METTL3 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L02647 METTL3 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L02648 METTL3 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L02649 METTL3 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品，具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
METTL3基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | METTL3 | 56339 | BC052244 | NM_019852 |
| About the gene | |
| Official Symbol | METTL3 |
| Previous Symbol | - |
| Official Full Name | methyltransferase like 3 |
| Synonyms | Spo8; M6A; MT-A70 |
| Location | 14q11.2 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | Q86U44 |
| Pathway/Library | m6A Modification Related Genes Library |
| Gene Summary | This gene encodes the 70 kDa subunit of MT-A which is part of N6-adenosine-methyltransferase. This enzyme is involved in the posttranscriptional methylation of internal adenosine residues in eukaryotic mRNAs, forming N6-methyladenosine. |
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文献和实验Stem Cell Rep：高绍荣团队揭示 Mettl14 以不依赖于 m⁶A 的方式驱动衰老相关分泌表型促进体细胞重编程
促进重编程。利用高通量测序技术，发现 Mettl14 在重编程的后期明显上调了衰老相关分泌表型（SASP）基因的表达水平。这些 SASP 因子由未成功重编程的细胞分泌，并以旁分泌的方式促进其周围的细胞成功重编程成为 iPSCs（图 1）。 图 1 Mettl14 调控 SASP 基因 为了探究 Mettl14 对体细胞重编程的影响，研究者构建了过表达 Mettl3、过表达 Mettl14 及其无活性形式的突变体质粒 5（图 2）。将其分别转染进重编程体系后发现，过表达 Mettl3
CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
前期记录先确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因然后对目的基因进行背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- 目标基因背景调查设计 sgRNA 及引物CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计好之后对前期文章的补充：设计 sgRNA 之后，需要对结果进行判断：但为什么 0.7044 分数的哪一个没有选，我也不知道为什么，总感觉他们的顺序不是随意的排的。或许有人能解答一下为什么。顺手把设计工具的解说放上
最近 CRISPR/Cas9 基因敲除技术可谓风靡全世界的实验室，CRISPR 被称为规律成簇间隔短回文重复，其实际上就是一种基因编辑器，是细菌用以保护自身对抗病毒的一个系统。后来，研究人员发现，它似乎是一种精确的万能基因武器，可以用来删除、添加、激活或抑制其他生物体的目标基因。由于其相对于前几代基因敲除技术而言更为简便高效。所以一经问世便受到科研界的热捧。利用 Cas9 质粒建立 knock-out 细胞系实验过程主要有以下几步：1. 确定待敲除基因的靶位点；2. 设计识别靶位点识别的一对
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