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上海经科化学科技有限公司
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5µg
pLenti-EGR2-sgRNA (EGR2基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因,或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性,全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除,以及通过puromycin筛选稳定细胞株;也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装,然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得,sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的EGR2基因敲除的质粒(L00236 pLenti-EGR2-sgRNA)、慢病毒(L00237 EGR2 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L00238 EGR2 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L00239 EGR2 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L00240 EGR2 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品,具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
EGR2基因的基本信息如下:
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | EGR2 | 1959 | BC035625 | NM_000399 |
| About the gene | |
| Official Symbol | EGR2 |
| Previous Symbol | KROX20 |
| Official Full Name | early growth response 2 |
| Synonyms | - |
| Location | 10q21.3 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | P11161 |
| Pathway/Library | cAMP & Ca Signaling Pathway Related Genes Library |
| Gene Summary | The protein encoded by this gene is a transcription factor with three tandem C2H2-type zinc fingers. Defects in this gene are associated with Charcot-Marie-Tooth disease type 1D (CMT1D), Charcot-Marie-Tooth disease type 4E (CMT4E), and with Dejerine-Sottas syndrome (DSS). Multiple transcript variants encoding two different isoforms have been found for this gene. |
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文献和实验两只小密封 不好意思,刚开始新的研究方向,涉及到要用基因敲除小鼠模型。有若干不懂的名词求助: 除题目上的问题外,还有类似Egr2 f/f CD4 -/- (右上角的f和-分别代表什么意思呀?有时候还是+/-)。不知道我得问题大家看懂了没有。。。。。实在是汗。在线等答案。谢谢啦!! laddcat123 Egr2 f/f CD4 -/-: f代表是条件性沉默,利用Cre蛋白可以使其沉默
CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
前期记录先确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因然后对目的基因进行背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- 目标基因背景调查设计 sgRNA 及引物CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计好之后对前期文章的补充:设计 sgRNA 之后,需要对结果进行判断:但为什么 0.7044 分数的哪一个没有选,我也不知道为什么,总感觉他们的顺序不是随意的排的。或许有人能解答一下为什么。顺手把设计工具的解说放上
最近 CRISPR/Cas9 基因敲除技术可谓风靡全世界的实验室,CRISPR 被称为规律成簇间隔短回文重复,其实际上就是一种基因编辑器,是细菌用以保护自身对抗病毒的一个系统。后来,研究人员发现,它似乎是一种精确的万能基因武器,可以用来删除、添加、激活或抑制其他生物体的目标基因。由于其相对于前几代基因敲除技术而言更为简便高效。所以一经问世便受到科研界的热捧。利用 Cas9 质粒建立 knock-out 细胞系实验过程主要有以下几步:1. 确定待敲除基因的靶位点;2. 设计识别靶位点识别的一对
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