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999
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亦高生物
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T4049-500ML

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文献和实验问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
2、器材(1)胰脏(2)组织捣碎机(3) 离心机(4)磁力搅拌器(5)透析袋、20目筛网、纱布、水浴锅(6)烧杯、量筒、刻度吸管、 试管 、玻璃漏斗(7)布氏漏斗、抽滤瓶、温度计、滴管、玻璃搅棒、纱布、pH试纸等 [方法和步骤] 方法一1、 胰蛋白酶原的提取取新鲜胰脏约150g,剥去结缔组织和脂肪,取净重100g,切成碎块,在组织捣碎机中捣碎,并加入2倍体积预冷的pH2.5~3.0乙酸化水溶液,制成匀浆。浆液倒入500mL烧杯中,用10
/L Tris-HCl、pH8.0,0.01mol/L EDTA、pH8.0。 配制方法:按上述各物质终浓度,把各自均配制成十倍浓度的溶液,配制溶液Ⅰ时,取三种十倍溶液各1体积于一容器中,定容至10体积即得溶液Ⅰ。 配制体积 500mL 1000mL (1)葡萄糖(M=198.17): 0.05 mol/L 4.954g 9.909g 10倍: 0.5 mol/L 49.54g 99.09g (2) Tris-HCl(M=121
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