- ￥353
- Sigma
- 美国
- B3876-25G
- 2026年02月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°-20°C
- 保质期：
1-3年
- 库存：
999
- 供应商：
亦高生物
- CAS号：
150-25-4
- 规格：
B3876-25G
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文献和实验仪上用新鲜购买的试剂与老的试剂分别进行PCR，比较其扩增产物结果。 复性条件不是最合适的。 重新计算引物Tm；应用降落PCR，最好再结合热启动PCR。验证引物浓度，如果必要可优化引物的浓度；若引物显然是问题的症结所在，重新设计合成新的引物。 被复性结合到模板上的引物不适合延伸。 优化MgCl2、模板DNA和dNTP的浓度；试验此PCR的pH值的范围；考虑用N-三甲基甘氨酸、N,N-二羟乙基甘氨酸或EPP等具有更低温度变异系数的化学物质替代Tris（Cheng et al. 1994）。应用新鲜制备
PCR，最好再结合热启动PCR。 验证引物浓度，如果必要可优化引物的浓度；若引物显然是问题的症结所在，重新设计合成新的引物。 被复性结合到模板上的引物不适合延伸。 优化MgCl2、模板DNA和dNTP的浓度；试验此PCR的pH值的范围；考虑用N-三甲基甘氨酸、N,N-二羟乙基甘氨酸或EPP等具有更低温度变异系数的化学物质替代Tris（Cheng et al. 1994）。 应用新鲜制备的热稳定DNA聚合酶。 重新纯化模板DNA以去除抑制物。 在恒定复性温度（55℃）条件下增加PCR
（一）试剂准备1. CSB缓冲液：42mM柠檬酸钠；0.83% N-lauryl sarcosine（十二烷基，N甲基甘氨酸钠）；0.2 mM β-巯基乙醇。2. 变性液：异硫氰酸胍（终浓度 4 M）25g、CSB缓冲液 33ml,混合直至完全溶解，可在65℃助溶。4℃保存备用。3. 2 M乙酸钠：pH 4.0。4. 异丙醇5. 无水乙醇、70%乙醇6. 酚：氯仿：异戊醇（25:24:1）7. DEPC H2O:100ml ddH2O中，加入DEPC 0.1ml,弃分振荡，37℃孵育过夜。15
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