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亦高生物
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P3910-500MG

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文献和实验溶液用于测定激活前的蛋白含量及酶活性。原溶液中加入5mg结晶胰 蛋白酶 ,轻轻搅拌均匀,25℃放置2~4h,或4℃放置12~16h,使胰 蛋白酶 原活化。每隔1h取样测定胰蛋白酶活性增长情况,直至酶激活速度变慢或停止增长。一般比活可达到3 500~4 000 BAEE单位/mg。留取2mL溶液用于测定激活后的蛋白质含量和酶活性。激活酶溶液用2mol/L硫酸调pH至2.5~3.0,滤纸过滤,滤去硫酸钙沉淀,收集滤液,4℃保存备用。方法二称取冷冻猪胰脏100
问:小弟要做蛋白酶体抑制剂筛选相关的工作,在dxy上看了前辈的不少文章,先谢谢大家了。不过我还是有些不了解: 1、大家做蛋白酶体相关实验时,蛋白酶体需要纯化吗?一般怎么纯化? 2、做蛋白酶体抑制剂的筛选相关步骤。 3、大家有没有谁做过蛋白酶体的表达的,亚基也行。 答:你去找一套叫 Methods in Enzymology的书,在 Volume 398 的PartB应该有你需要的东西。 Table of Contents-B.pdf
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以,蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用
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