Quick免疫印迹溶液套装（转膜液、封闭液、抗体稀释液、洗涤

快速免冰浴免疫印迹溶液套装是一种包含了 Western blot 实验过程中常用的新一代改良的快速转膜液、无蛋白快速封闭液、通用型抗体稀释液以及洗涤液组成的溶液套装。转膜液、封闭液和抗体稀释液效果优于传统的同类产品，具有使用时间短、兼容性好、特异性高、安全无毒害等优点，大大缩短了 Western blot 实验时间，节省实验成本。

本产品含 10×快速转膜液 500mL、封闭液 100mL、抗体稀释液 200mL、10×洗涤液 100mL，可以进行 10 张 NC 膜/PVDF 膜的转印实验。

产品特点 ：

1.    实现快速转膜，5-30min 可以完成转膜过程；

2.    实现快速封闭，5-15min 完成封闭，封闭性强、背景低、特异性好；

3.    体系兼容性好，可用于 Tris-Gly 体系、Hepes 体系、Bis-Tris 体系等凝胶；

4.    安全无毒，本套装溶液不含甲醇，后期无需添加甲醇等有毒试剂；

5.    套装不含血清、白蛋白和动物源成分，确保较高信噪比；不含磷酸盐成分，不影响碱性磷酸酶的活性；不含防腐剂，兼容 HRP 、AP 标记以及生物素化抗体的检测。

使用方法 ：

一、快速转膜液

1.     1×快速转膜液的配制：取 10×转膜液，规格 100mL+无水乙醇 100mL+去离子水 800mL，最后用水补充至 1L ，混匀4℃备用。

2.     准备转印膜及凝胶，并组装好转印设备。

3.     转印槽中加入 1×快速转膜液，设定恒流 400mA ，5-30min 即可完成转膜。对于大分子量蛋白，可适当增加转膜时间。若转膜时间大于 30min ，仅在转膜槽内用冰盒降温即可，如下：

目的蛋白≤25kDa ，采用恒流 400mA ，转膜时间 5-10min；

25kDa＜目的蛋白≤50kDa ，采用恒流 400mA ，转膜时间 10-20min；

50kDa＜目的蛋白≤75kDa ，采用恒流 400mA ，转膜时间 20-30min；

75kDa＜目的蛋白≤100kDa ，采用恒流 400mA ，转膜时间 30-40min；

目的蛋白＞100kDa ，采用恒流 400mA ，转膜时间按速率 2.5kDa/min 计算。

二、快速封闭液

1.    完成转膜后，将膜移入到平皿或者其他适合的容器中（可以不洗涤膜）。

2.    根据膜的大小，加入适量体积的无蛋白快速封闭液，确保充分浸没覆盖膜，对于 7.5×8cm的膜推荐使用量 5-10mL。

3.    置于水平摇床上，室温条件下振荡孵育 10-15min。

4.    取出封闭完成的膜，用 1×洗涤液（10×洗涤液用纯水稀释至 1×即可）冲洗膜 2-3 次，即可用于一抗孵育等后续 Western blot 实验。

三、抗体稀释液

参考所用一抗/二抗的说明，以及样品中目的蛋白的含量，按照适当比例，如 1:1000、1:500等稀释一抗/二抗，稀释后即可直接用于 Western blot。

注意事项 ：

1.    取放 PVDF 膜和 NC 膜应使用平头镊子，并仅轻轻夹取其边角，操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。

2.    PVDF 膜一经浸润和活化，需一直保持湿润，根据 Western blot进行到的具体步骤可放置于 Western blot转膜液或洗涤液等适当溶液中，否则可能会产生难以封闭的异常背景。

3.    本产品所用转膜液为快速型，需根据目的蛋白大小调整转膜时间，防止蛋白穿过膜。

4.    由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的，因此对于一些特殊的实验，可能需要根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。

5.    套装溶液中的任何一种产品，均可以在 Western 实验中独立使用，不影响最终效果。

6.    本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

7.    为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。