- ￥3870 - 22680
- 西格
- XG-DB3810
- 国产
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
29
- 英文名：
8030489C12Rik, Cell migration inducing 1, Cell migration-inducing gene 1 protein, MGC116271, MIG1, Protein SKD1, Skd1, SKD1B, Suppressor of K(+) transport growth defect 1, Suppressor of K+ transport defect 1, Vacuolar protein sorting 4 homolog B, Vacuolar protein sorting 4 homolog B (S. cerevisiae), Vacuolar protein sorting 4b, Vacuolar protein sorting-associated protein 4B
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
-20°C for up to 1 year
- 规格：
50μg/200ug/1mg
| 规格： | 50μg | 产品价格： | ￥3870.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 200ug | 产品价格： | ￥7200.0 |
| 规格： | 1mg | 产品价格： | ￥22680.0 |
| 货号 | XG-DB3810 | 种属 | Human |
| 宿主 | E.Coli | 表达区间 | 1-444 |
| 分子量 | 51.2 kDa | 标签 | N-terminal His Tag |
| 规格 | 50μg、200ug、1mg | 用途 | 仅供科研实验 |
| 别称：8030489C12Rik, Cell migration inducing 1, Cell migration-inducing gene 1 protein, MGC116271, MIG1, Protein SKD1, Skd1, SKD1B, Suppressor of K(+) transport growth defect 1, Suppressor of K+ transport defect 1, Vacuolar protein sorting 4 homolog B, Vacuolar protein sorting 4 homolog B (S. cerevisiae), Vacuolar protein sorting 4b, Vacuolar protein sorting-associated protein 4B 纯度 Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses 应用 Western Blot, ELISA 性状 Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution |
重组蛋白的制备方法
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：
表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。
二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色，分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
EFNA5 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 标签)
Ferritin peptide 铁蛋白抗原 0.5mgFerritin peptide 铁蛋白抗原
CD83重组大鼠 CD83 蛋白 (His 标签) Protein
IL36B Protein Human 重组人 IL36B / IL1F8 蛋白 (His 标签)
TAOK3重组人 TAOK3 / JIK / MAP3K18 蛋白 (aa 1-411, His & GST 标签) Protei⤭
大鼠雌一醇(E1)ELISA试剂盒 ，英文名： E1 ELISA Kit
Mouse 25 hydroxyvitamin D3 (25 (OH) ELISA kit D3/25 HVD3) ELISA Kit 小鼠25羟基维生素D3(25(OH)ELISA试剂盒D3/25 HVD3)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠结缔组织生长因子(mouse CTGF) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforLHELISAKit大鼠促黄体激素规格：48T/96T
通用型HHV6-A(HUMANHERPESVIR⤭䎸⤭
Recombinant Human VPS4B小鼠0脂酰肌醇特异性0酯酶Cβ1(PLCβ1)ELISA试剂盒 ，英文名： PLCβ1 ELISA Kit
人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA检测试剂盒Humaelaxin,RLNELISAKit 96T/48T
大鼠叶酸(FA)免疫试剂盒 Rat Folic acid,FA ELISA Kit
英文名称谷氨酸脱羧酶抗体规格：96T/48T
伽蓝(kalanchoe)增殖培养基500毫升溶液/片剂
ELISAKitLTA人脂0壁酸规格：48T/96T
CD38 Protein Rabbit 重组兔 SCARB3 蛋白 (His 标签)
基质金属蛋白酶9(MMP9)重组蛋白 Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)
KLK1重组小鼠 KLK1 / Kallikrein 1 蛋白 (His 标签) Protein
MEP1A Protein Human 重组人 MEP1A / PPHA 蛋白 (His 标签)
LRG1重组人 LRG1 蛋白 (Fc 标签) Protein
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