- ￥3645
- LABLEAD
- 北京
- T2113
- 2025年11月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
9999
- 规格：
1ml
货号：T2113
存储条件：-20C避光保存，Trans buffer可保存于2-8℃，有效期一年，使用前请先将本品轻轻混匀。
产品说明：
LabFect Plasmid质粒DNA转染试剂是专门用于质粒DNA细胞转染的转染试剂。LabFect Plasmid 具有非常卓越的转染性能，可高效转染多种贴壁细胞、原代细胞和悬浮细胞，转染效率在贴壁细胞中高达90%以上（EGFP质粒）。LabFect Plasmid 不仅可转染较大分子的质粒DNA，还可转染RNA和小分子DNA。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同，LabFect Plasmid 采用生物可降解材料配制，对细胞的毒性很低，转染后细胞死亡率不到10%。LabFect Plasmid 使用也非常方便，先将转染试剂与质粒DNA混合，再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中，血清不影响其转染效果，不必刻意添加或更换培养液，操作十分简便。
产品特点：
卓越的细胞转染性能：可高效转染多种原代细胞，转染效率高达70%以上；
极低的细胞毒性：使用可降解生物材料，细胞毒性低，转染细胞死 亡率不到10%，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响，实验结果更为客观；
操作简便，可用于含血清培养基培养细胞的转染，转染前后不需要更换培养液。
注意事项：
转染前的细胞汇合度以90%左右为宜，转染时细胞生长状态应保持良好，不要有支原体污染。
1、首次转染，建议进行优化实验，如24孔培养板，每孔质粒用量0.8ug，转染试剂用量可选择2.0ul、2.5ul、3.0ul、3.5ul进行优化。
2、应避免转染复合物制备体系中存在血清，因血清会干扰RFect与DNA形成复合物，转染所用培养基中尽量不要使用抗生素。
3、如果需要稳转，请在转染24-48h后加入筛选培养基。
4、本试剂主要用于质粒DNA转染，如需质粒DNA、RNA、siRNA均可转染的试剂，请选择RFect Prime核酸转染试剂。
适用细胞系：
293T，A549，B16F10，HEK 293，HeLa，Hepa 1-6，HepG2，BHK-21，BNL.CL2，BRL-3A，C2C12，C6，Clone 9，COS-1， COS-7，Daoy，DBTRG-05MG，DI-TNC1，DU 145，HLF-a，Huh-7，K562，KB，KLN 205，NCaP-FGC，MCF-7，MEL，Neuro-2a，NIH3T3，OVCAR3， PC3，PC-12，4T1，ACNN，BJ，BT-549，CACO-2，H460，H9C2，HCT116，Hep-3B，Hs578T，HT-1080，MCF10A，MDA-MB-231，NCI-H23，PANC-1，RAW264.7，Saos-2，RD，SK-MEL-28，SK-OV-3 SW480，U2OS，Vero，293F，BE(2)C，CHO-S，CV-1，HT-29，Jurkat，RKO，SK-BR3 等。
试剂盒内容物：LabFect 质粒DNA转染试剂
方法步骤（以24孔板转染为例）:
1. 细胞接种:
a. 转染前24小时左右对细胞进行铺板（不含抗生素），培养过夜；
b. 确保转染时细胞密度达90%左右。
c. 最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基，以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。
2. LabFect/DNA复合物包装(该步完成后应立即转染):
a. 在1.5 ml无菌离心管中加入50µl trans buffer，并添加适量的转染试剂(参见附表) 。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。
b. 在1.5 ml无菌离心管中加入50µl trans buffer，并添加适量的DNA，用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。(参见附表。首次使用建议在附表提供的DNA和转染试剂参考量的基础上进行优化实验，以摸索两者之间的最you搭配比例)。
c. 将LabFect-培养基混合物滴加至DNA-培养基混合物中，用移液器 轻轻混匀后在室温静置15~20分钟后，立即转染。注意： LabFect-培养基混合物和DNA-培养基混合物的混合次序非常重要，切勿颠倒。离心管最好使用聚丙烯离心管。
3. 转染:
a. 将步骤2制备的转染复合物滴加至培养基中，边加边轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。加完后，立即将培养板转入培养箱继续培养。
b 培养12小时后即可观察，最佳观察或收获时间为24~48小时。
c. LabFect在完全培养基中仍有较高的转染效率，因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。如果转染后需要更换新鲜培养基， 请于加入LabFect/DNA复合物12~24小时后进行。
质量控制
本产品经严格的质量检验证明，无生物污染
注意：
本产品仅用于科研实验
附表：不同培养体系推荐初始转染条件
| 培养皿 |
96 孔板 |
48 孔板 |
24 孔板 |
12 孔板 |
6 孔板 |
250px 皿 |
|
| 表面积 (cm2) |
0.35 |
1.0 |
1.9 |
3.8 |
9.6 |
59 |
|
| 培养基、试剂、DNA 量 |
trans buffer(μl) |
20 |
50 |
100 |
200 |
400 |
2000 |
| LabFect (μl) |
0.5 |
1.3 |
2.5 |
5.0 |
10 |
50 |
|
| 1μg/μl plasmid (μl) |
0.16 |
0.4 |
0.8 |
1.6 |
3.2 |
16 |
|
| 完全培养基(ml) |
0.10 |
0.25 |
0.50 |
1.0 |
2.0 |
10 |
|
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