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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
25
- 英文名:
Desethyl KBT-3022
- CAS号:
101001-72-3
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
1mg 5mg 10mg 20mg
规格:1mg 5mg 10mg 20mg
CAS:101001-72-3
别名:N/A
化学名:N/A
Desethyl KBT-3022分子式:C23H20N2O4S
分子量:420.48
溶解度:Soluble in DMSO
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
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本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
| 产品名称 | Desethyl KBT-3022 | 产品货号 | CS-01Y64673 |
| 规格 | 1mg 5mg 10mg 20mg | CAS号 | 101001-72-3 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C23H20N2O4S |
| 分子量 | 420.48 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Desethyl KBT-3022 is the main active metabolite of the new antiplatelet agent, KBT-3022.Pretreatment with desethyl KBT-3022 0.1, 0.3 and 1 mg/kg, i.v. prolongs the time required to achieve thrombotic occlusion in the femoral artery and inhibits collagen-induced platelet aggregation in whole blood ex vivo, each in a dose-dependent manner. Desethyl KBT-3022 inhibits the thrombin-induced aggregation of washed platelets in a concentration-dependent manner 1-40 μM[1].[1]. Shimazawa M, et al. Antithrombotic effects in a rat model of aspirin-insensitive arterial thrombosis of desethyl KBT-3022, the main active metabolite of a new antiplatelet agent, KBT-3022. Eur J Pharmacol. 1997 Jun 11;328(2-3):183-9.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| ([¹³C₆]Leu¹⁷)-Thymosin β₄ (human, bovine, horse, rat) | 1,4-DPCA ethyl ester |
| 1,4-PBIT (dihydrobromide) | Cav-1 人窖蛋白Caveolin1ELISA检测试剂盒 |
| 1,5,7-Triazabicyclo[4.4.0]dec-5-ene | OPAs 人不透光相关蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 1,5-Isoquinolinediol | AFA/snoRNP/U3RNP 人抗核仁纤维蛋白抗ELISA检测试剂盒 |
| 1,6-Anhydro-D-galactose | ALB 人尿微量白蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 1,6-Dimethoxyphenazine | AZU 人天青杀素ELISA检测试剂盒 |
| 1,7-Dimethyluric Acid | HC gp-39 人软骨糖蛋白39ELISA检测试剂盒 |
| 10(11)-Cl-BBQ Mixture | HLAMP-2 人溶酶相关膜蛋白2ELISA检测试剂盒 |
| 10(S),17(S)-DiHDHA | flagellin 人鞭毛蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 10,13-epoxy-11-methyl-Octadecadienoic Acid | MAC 人膜攻击复合物ELISA检测试剂盒 |
| 10058-F4 | ConA 人刀豆素AELISA检测试剂盒 |
| 10074-G5 | EK 人表皮角蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 10-Cl-BBQ | Desethyl KBT-3022EL 人优球蛋白ELISA检测试剂盒 |
| Nithiamide | f-Hb 人游离血红蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 人抗磷脂酰抗ELISA试剂盒 | Protamine 人鱼精蛋白ELISA检测试剂盒 |
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文献和实验识别新型冠状病毒上的关键抗原表位。复旦大学应天雷教授团队在 Emerging Microbes & Infections 杂志在线发表题为《Potent binding of 2019 novel coronavirus spike protein by a SARS coronavirus-specific human monoclonal antibody》的研究论文,报道了一种新型冠状病毒特异性的人单克隆抗体 —CR3022,可与新型冠状病毒受体结合域 RBD 结合,具有发挥预防和治疗新型
第二医科大学提供。采用ELISA间接法,按提供试剂单位制定的抗Hp抗体IgG检测程序进行。方法简述如下:用10μg/ml的抗原(多株Hp超声粉碎物)包被聚苯乙烯反应板,0.1ml/孔,4℃过夜。用10%牛血清磷酸缓冲液(pH7.4)封闭37℃1h。加待检样品为稀释度1:200的病人血清,37℃结合2h。加辣根过氧化酶标记的羊抗人IgG抗体37℃孵育。最后加邻苯二胺作基质,2M硫酸手反应终止剂。每加一层试剂时用0.05%PBSTWeen20(pH7.4)洗涤3次。显色后用DG―3022型酶联仪在490nm波长
、有无胃十二指肠病史、发病时间及确诊手段,有无消化道症状,有无肝炎史、嗜好及生活习惯、家庭经济状况等。随后抽取被调查者的静脉血2ml,分离血清后置20°C冰箱中冷冻,待测血清抗HpU抗体。采用中国预防医学科学院流行病学微生物研究所提供的高度纯化幽门螺杆菌尿素酶(HpU)抗原,用ELISA法检测血清中相应的IgG抗体。为消除系统误差,所有血清均由专人负责测定,通过稀释、反复洗涤、加酶、显色等程序后,一律采用同一酶标光度仪(南京产3022型),以450mm波长测定各孔OD450值,样本平均OD450值
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