- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y63942
- 国产
- 2025年09月12日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
24
- 英文名：
Bestatin hydrochloride
- CAS号：
65391-42-6
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
5mg 10mg 25mg 100mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
化学性质:
Bestatin hydrochloride规格：5mg 10mg 25mg 100mg
CAS：65391-42-6
别名：
化学名：(2S)-2-[[(2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoic acid;hydrochloride
分子式：C16H25ClN2O4
分子量：344.83
溶解度：≥ 125 mg/mL in DMSO, ≥ 34.2 mg/mL in H2O, ≥ 68 mg/mL in EtOH
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Bestatin hydrochloride, also known as Ubenimex, is an inhibitor of aminopeptidase B and N (APN)/CD13 [1].Bestatin, an antibiotic of microbial origin, is a potent inhibitor of some aminopeptidases which can be administered to cultured cells, intact animals and humans with low toxicity. It has been used as an useful tool to assess the physiological role of certain mammalian exopeptidases in the regulation of the immune system, the growth of tumors and their invasion of surrounding tissues, and the degradation of cellular proteins [2].In vivo: In a mouse dorsal air sac assay, oral administration of bestatin (100-200 mg/kg/day) showed a significant inhibitory activity against the melanoma cell-induced angiogenesis. Bestatin also inhibited the tube-like formation of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Furthermore, after the orthotopic implantation of B16-BL6 melanoma cells into mice, bestatin administration (50-100 mg/kg/day, i.p) reduced the number of vessels oriented towards the established primary tumor mass on the dorsal side of mice [1].References:[1]. Aozuka Y1, Koizumi K, Saitoh Y, Ueda Y, Sakurai H, Saiki I. Anti-tumor angiogenesis effect of aminopeptidase inhibitor bestatin against B16-BL6 melanoma cells orthotopically implanted into syngeneic mice. Cancer Lett. 2004 Dec 8;216(1):35-42.[2]. Scornik OA1,Botbol V.Bestatin as an experimental tool in mammals. Curr Drug Metab.2001 Mar;2(1):67-85.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
| 产品名称 | Bestatin hydrochloride | 产品货号 | CS-01Y63942 |
| 规格 | 5mg 10mg 25mg 100mg | CAS号 | 65391-42-6 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C16H25ClN2O4 |
| 分子量 | 344.83 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Bestatin hydrochloride规格：5mg 10mg 25mg 100mg
CAS：65391-42-6
别名：
化学名：(2S)-2-[[(2S,3R)-3-amino-2-hydroxy-4-phenylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoic acid;hydrochloride
分子式：C16H25ClN2O4
分子量：344.83
溶解度：≥ 125 mg/mL in DMSO, ≥ 34.2 mg/mL in H2O, ≥ 68 mg/mL in EtOH
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Bestatin hydrochloride, also known as Ubenimex, is an inhibitor of aminopeptidase B and N (APN)/CD13 [1].Bestatin, an antibiotic of microbial origin, is a potent inhibitor of some aminopeptidases which can be administered to cultured cells, intact animals and humans with low toxicity. It has been used as an useful tool to assess the physiological role of certain mammalian exopeptidases in the regulation of the immune system, the growth of tumors and their invasion of surrounding tissues, and the degradation of cellular proteins [2].In vivo: In a mouse dorsal air sac assay, oral administration of bestatin (100-200 mg/kg/day) showed a significant inhibitory activity against the melanoma cell-induced angiogenesis. Bestatin also inhibited the tube-like formation of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Furthermore, after the orthotopic implantation of B16-BL6 melanoma cells into mice, bestatin administration (50-100 mg/kg/day, i.p) reduced the number of vessels oriented towards the established primary tumor mass on the dorsal side of mice [1].References:[1]. Aozuka Y1, Koizumi K, Saitoh Y, Ueda Y, Sakurai H, Saiki I. Anti-tumor angiogenesis effect of aminopeptidase inhibitor bestatin against B16-BL6 melanoma cells orthotopically implanted into syngeneic mice. Cancer Lett. 2004 Dec 8;216(1):35-42.[2]. Scornik OA1,Botbol V.Bestatin as an experimental tool in mammals. Curr Drug Metab.2001 Mar;2(1):67-85.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| ([¹³C₆]Leu¹⁵)-pTH (1-34) (human) | 1,3-Dicaffeoylquinic acid |
| 1,3-Dilinoleoyl-2-Oleoyl-rac-glycerol | FPB 人血纤肽/纤维蛋白肽BELISA检测试剂盒 |
| 1,3-Dioctanoyl-2-Oleoyl-rac-glycerol | Fibrin 人血纤蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 1,3-Dipalmitoleoyl-rac-glycerol | HbC 人血红蛋白CELISA检测试剂盒 |
| 1,3-Dipalmitoyl-2-Docosahexaenoyl-rac-glycerol | CMLC-1 人心肌肌凝蛋白轻链1ELISA检测试剂盒 |
| 1,3-Dipalmitoyl-2-Eicosapentaenoyl-rac-glycerol | HbH 人血红蛋白HELISA检测试剂盒 |
| 1,3-Dipalmitoyl-2-Octanoyl-rac-glycerol | IAPP 人胰岛淀粉样多肽ELISA检测试剂盒 |
| 1,3-Dipalmitoyl-glycerol | LBP 人脂多糖结合蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 1,3-Distearoyl-2-Oleoyl-rac-glycerol | SmIg 人细胞膜表面免疫球蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 1,3-PBIT (dihydrobromide) | CYFRA21-1 人细胞角蛋白21-1片段ELISA检测试剂盒 |
| 1,4-Benzoquinone | CDT 人糖缺失性转铁蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 1,4-Chrysenequinone (Chrysene-1,4-dione) | p2 人神经髓鞘蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 1,4-Cineole | Bestatin hydrochlorideGSP 人糖化蛋白ELISA检测试剂盒 |
| AAI101 | GA 人糖化白蛋白ELISA检测试剂盒 |
| 人丝氨酸脱水酶ELISA试剂盒 | MAG 人抗髓鞘相关糖蛋白抗ELISA检测试剂盒 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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Bestatin hydrochloride
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