- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y64800
- 国产
- 2025年11月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
59
- 英文名：
Enniatin B1
- CAS号：
19914-20-6
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
1mg 5mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
化学性质:
Enniatin B1规格：1mg 5mg
CAS：19914-20-6
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C34H59N3O9
分子量：653.9
溶解度：DMF: Soluble,DMSO: Soluble,Ethanol: Soluble,Methanol: Soluble
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Enniatin B1 is a Fusarium mycotoxin. Enniatin B1 inhibits acyl-CoA: cholesterol acyltransferase (ACAT) activity with an IC50 of 73 μM in an enzyme assay using rat liver microsomes[1]. Enniatin B1 crosss the blood-brain barrier[2]. Enniatin B1 decreases the activation of ERK (p44/p42). Enniatin B1 inhibits moderately TNF-α-induced NF-κB activation[3].CCF-STTG1 cells are sensitive to Enniatin B1 (IC50=4.4 μM)[2].References:[1]. Tomoda H, et al. Inhibition of acyl-CoA: cholesterol acyltransferase activity by cyclodepsipeptide antibiotics. J Antibiot (Tokyo). 1992 Oct;45(10):1626-32.[2]. Krug I, et al. Transport of enniatin B and enniatin B1 across the blood-brain barrier and hints for neurotoxic effects in cerebral cells. PLoS One. 2018 May 16;13(5):e0197406.[3]. W?tjen W, et al. Enniatins A1, B and B1 from an endophytic strain of Fusarium tricinctum induce apoptotic cell death in H4IIE hepatoma cells accompanied by inhibition of ERK phosphorylation. Mol Nutr Food Res. 2009 Apr;53(4):431-40.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
| 产品名称 | Enniatin B1 | 产品货号 | CS-01Y64800 |
| 规格 | 1mg 5mg | CAS号 | 19914-20-6 |
| 含量 | >99.00% | 分子式 | C34H59N3O9 |
| 分子量 | 653.9 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Enniatin B1规格：1mg 5mg
CAS：19914-20-6
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C34H59N3O9
分子量：653.9
溶解度：DMF: Soluble,DMSO: Soluble,Ethanol: Soluble,Methanol: Soluble
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Enniatin B1 is a Fusarium mycotoxin. Enniatin B1 inhibits acyl-CoA: cholesterol acyltransferase (ACAT) activity with an IC50 of 73 μM in an enzyme assay using rat liver microsomes[1]. Enniatin B1 crosss the blood-brain barrier[2]. Enniatin B1 decreases the activation of ERK (p44/p42). Enniatin B1 inhibits moderately TNF-α-induced NF-κB activation[3].CCF-STTG1 cells are sensitive to Enniatin B1 (IC50=4.4 μM)[2].References:[1]. Tomoda H, et al. Inhibition of acyl-CoA: cholesterol acyltransferase activity by cyclodepsipeptide antibiotics. J Antibiot (Tokyo). 1992 Oct;45(10):1626-32.[2]. Krug I, et al. Transport of enniatin B and enniatin B1 across the blood-brain barrier and hints for neurotoxic effects in cerebral cells. PLoS One. 2018 May 16;13(5):e0197406.[3]. W?tjen W, et al. Enniatins A1, B and B1 from an endophytic strain of Fusarium tricinctum induce apoptotic cell death in H4IIE hepatoma cells accompanied by inhibition of ERK phosphorylation. Mol Nutr Food Res. 2009 Apr;53(4):431-40.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| H-Lys(Z)-OH | Urechistachykinin II |
| Chloroquine-d5 (phosphate) | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶3检测试剂盒 GALNT3 ELISA Kit |
| Alisporivir (DEB-025) | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶2检测试剂盒 GALNT2 ELISA Kit |
| Cefixime | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶13检测试剂盒 GALNT13 ELISA Kit |
| Besifloxacin HCl | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶14检测试剂盒 GALNT14 ELISA Kit |
| Atovaquone | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶12检测试剂盒 GALNT12 ELISA Kit |
| Picloxydine | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶11检测试剂盒 GALNT11 ELISA Kit |
| Antibiotic-5d | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶10检测试剂盒 GALNT10 ELISA Kit |
| ALS-8112 | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4检测试剂盒 GALNT4 ELISA Kit |
| PF-07304814 | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶5检测试剂盒 GALNT5 ELISA Kit |
| Tiadinil | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶6检测试剂盒 GALNT6 ELISA Kit |
| Mulberroside C | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶7检测试剂盒 GALNT7 ELISA Kit |
| N-desethyl Amodiaquine (hydrochloride) | Enniatin B1多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶8检测试剂盒 GALNT8 ELISA Kit |
| Isavuconazole-d4 | 多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶9检测试剂盒 GALNT9 ELISA Kit |
| 人前列腺素D2ELISA试剂盒 | 多萜醇磷酸-N-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶1检测试剂盒 DPAGT1 ELISA Kit |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验相关实验
B是 Backcross，即回交之意，而 B1 则为表示回交第一代的记号。
B1 细胞 B1细胞为CD5+B细胞，所介导的免疫应答特点为：不发生体细胞突变，无亲和力成熟，仅产生低亲和力的IgM抗体，不产生记忆细胞。 1．产生天然IgM 天然IgM是预成抗体的主要成分，主要由D1细胞分泌。这种抗体是多反应性的，能与许多病原体相关糖类抗原结合。如前所述，天然抗体可以看作是一种模式识别分子，产生机制尚未完全阐明，估计和机体在个体发育中遭受过病原体感染有关。天然抗体能保护机体防御细菌(如肺炎链球菌)感染
【进展|热点】Nature Review Immunology: 掀起B1细胞的「红盖头」
揭开B1细胞的神秘面纱——深入了解B1细胞 文章出处：The double life of a B-1 cell: self-reactivity selects for protective effector functions. Nat Rev Immunol. 2011. 11:34-46 主要内容： 不像对于T细胞我们研究和认识得较多，对于B细胞我们研究和认识得都较少。B细胞主要可以分为B1细胞和B2细胞，B1细胞根据是否表达CD5又可以进一步分为B1-a细胞
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Enniatin B1
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