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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
36
- 英文名:
Elamipretide (MTP-131)
- CAS号:
736992-21-5
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
10mM*1mLinDMSO 1mg 5mg 10mg 25mg
规格:10mM*1mLinDMSO 1mg 5mg 10mg 25mg
CAS:736992-21-5
别名:RX-31; SS-31
化学名:N/A
Elamipretide (MTP-131)分子式:C32H49N9O5
分子量:639.79
溶解度:DMSO : ≥ 29 mg/mL (45.33 mM)
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
| 产品名称 | Elamipretide (MTP-131) | 产品货号 | CS-01Y64747 |
| 规格 | 10mM*1mLinDMSO 1mg 5mg 10mg 25mg | CAS号 | 736992-21-5 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C32H49N9O5 |
| 分子量 | 639.79 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Elamipretide is a cardiolipin peroxidase inhibitor and mitochondria-targeting peptide.[1]. Sabbah HN et al. Chronic Therapy With Elamipretide (MTP-131), a Novel Mitochondria-Targeting Peptide, Improves Left Ventricular and Mitochondrial Function in Dogs With Advanced Heart Failure. Circ Heart Fail. 2016 Feb;9(2).
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| H-Leu-OBzl.TosOH | JNJ-40418677 |
| Firocoxib | 原钙黏素β11检测试剂盒 PCDHβ11 ELISA Kit |
| PHA 543613 hydrochloride | 原钙黏素β10检测试剂盒 PCDHβ10 ELISA Kit |
| Lumiracoxib | 原钙黏素α9检测试剂盒 PCDHα9 ELISA Kit |
| Iodophenpropit dihydrobromide | 原钙黏素β1检测试剂盒 PCDHβ1 ELISA Kit |
| Spaglumic acid | 原钙黏素α8检测试剂盒 PCDHα8 ELISA Kit |
| 3-hydroxy Octanoic Acid | 原钙黏素α7检测试剂盒 PCDHα7 ELISA Kit |
| Desvenlafaxine | 原钙黏素α6检测试剂盒 PCDHα6 ELISA Kit |
| BINA | 原钙黏素β12检测试剂盒 PCDHβ12 ELISA Kit |
| BP 897 | 原钙黏素β13检测试剂盒 PCDHβ13 ELISA Kit |
| Phenacetin | 原钙黏素β14检测试剂盒 PCDHβ14 ELISA Kit |
| PD 168077 maleate | 原钙黏素β15检测试剂盒 PCDHβ15 ELISA Kit |
| Dasotraline hydrochloride | Elamipretide (MTP-131)原钙黏素β16检测试剂盒 PCDHβ16 ELISA Kit |
| Streptogramin B | 原钙黏素β2检测试剂盒 PCDHβ2 ELISA Kit |
| 人抗凝血酶ⅢELISA试剂盒 | 原钙黏素β3检测试剂盒 PCDHβ3 ELISA Kit |
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文献和实验Protein Expression and Purification of MBP-T antigen (131-259)
Comments: T antigen (131-259)is an MBP-Hisx6-fusion protein constructed by Laura Mizoue (refer to the wisdom page for details on the construct). i.Pick a single colony from freshly transformed cells (BL21 (DE3)is the expression host)into 2 ml of LB
FACS Procedures for Apoptosis Detection
, although it is very difficult to obtain tight CVs. The protocol below is carried out in 96-well V-bottomed micro titer plates (MTP); with some modifications, it could be carried out in 12 x 75 mm plastic tubes. Phoenix Flow Systems has a protocol for pre-fixing samples
的凋亡变化。所以制备过程极易造成假阳性和假阴性,又容易形成弱荧光区域严重的不可消隐的延散性干扰。原代分离的实体组织的细胞样本、原代分离培养的细胞样本、贴壁生长的传代细胞样本都很难避免上述情况的出现,即不适合做流式凋亡检测。只有离散组织样本(血细胞)、个别极易分散的组织样本(脾、胸腺等)、悬浮生长且极易分散的细胞样本能满足流式凋亡检测的制备要求。注意,这里说的是所有的在流式上进行的凋亡检测,不存在有的样本不能做PI单染却又可以做AV或者MTP的情况,要不就都能做,要不就都不能做,决定结果的是细胞的底子
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









