包被用HCG-alpha亚基单克隆抗体

ELISA 原理与分类

检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要获得针对受检抗原的特异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标用的抗体最好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标

尿液检查：人绒毛膜促性腺激素检查HCG

应用。 　　（三）酶联免疫吸附试验（ELISA） 　　该方法目前已广泛应用于临床，其基本原理是运用夹心免疫酶分析技术。即采用HCG单克隆抗体包被于固相表面，样品中的HCG都将与支持物表面的抗体相结合。与样品一孵育后，冲洗表面，然后加入特异性酶标抗β-HCG亚基的单克隆抗体，最后加入酶作用的基质，即产生颜色。该法可目测，灵感度为20-50Mu/ml，采用抗β-HCG单克隆抗体二点酶免疫法进行定量，灵敏度可达2-10mU/ml.目前免疫酶法进一步发展为更简便、适于病人自检的一步

ELISA 中的抗原与抗体的反应

特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物（例如血清）中测定某一特定的物质，而不需先分离待检物。 但是这种特异性也不是绝对的。假使两种化合物有着部分相同的结构，在抗原抗体反应中可出现交叉反应。例如：绒毛膜促性腺激素（hCG）和黄体生成激素（LH）均由 α 和 β 两个亚单位组成，其结构的不同处在 β 亚单位，而两者的 α 亚单位是同类的。用 hCG 免疫动物所得的抗血清中含有抗 α-hCG 和抗 β-hCG两种抗体，抗 α-hCG 抗体将与LH中的 α 酶位发生交叉反应。在临床检验中，如用抗 hCG