叠氮-聚乙二醇-琉基,2K

蛋白A—胶体金(PAg)复合物的制备方法

加入2mg蛋白A，5min后，加入0.3ml PEG作为稳定剂，然后以15000r/min离心45min(不同方法制备的金离心速度不同)，略带红色的松散的复合物沉淀即为PAg复合物。小心弃去上清液，加入PBS 冲洗，如上，松散的PAg复合物置于PBS溶液中，按0.2mg/ml的比例加入聚乙二醇作为稳定剂，保存于硅化的玻璃器皿中备用，也有主张将上述PAg复合物放入3～6ml 5%甘油—0.05%聚乙二醇—0.02%叠氮钠混合液中，再离心，弃去无色上清液后，收取管底部浓缩纯化的PAg复合物置4℃保存

胶体金标记实验步骤

蛋白量再加10％即为最佳标记蛋白量。3、标记：胶体金与蛋白质（IgG）的结合 将胶体金和IgG溶液分别以0.1Mol/L K2CO3调pH至9.0，电磁搅拌IgG溶液，加入胶体金溶液，继续搅拌10min，加入一定量的稳定剂以防止抗体蛋白与胶体金聚合发生沉淀。常用稳定剂是5％胎牛血清（BSA）和1％聚乙二醇（分子量20KD）。加入的量：5％BSA使溶液终浓度为1％；1％聚乙二醇加至总溶液的1／10.在接近并略为高于蛋白质等电点的条件下标记是比较合适的，在此情况下蛋白质分子在金颗粒表面的吸附量最大

胶体金标记实验的操作方法与步骤

将胶体金和IgG溶液分别以0.1Mol/L K2CO3调pH至9.0，电磁搅拌IgG溶液，加入胶体金溶液，继续搅拌10min，加入一定量的稳定剂以防止抗体蛋白与胶体金聚合发生沉淀。常用稳定剂是5%胎牛血清(BSA )和1%聚乙二醇(分子量20KD)。加入的量：5%BSA使溶液终浓度为1%;1%聚乙二醇加至总溶液的1/10. 在接近并略为高于蛋白质等电点的条件下标记是比较合适的，在此情况下蛋白质分子 在金颗粒表面的吸附量最大。 下述标记步骤最为常见： ①