Recombinant Human LHPP

商品属性：

货号	XG-DB2504	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-270
分子量	31.8 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：FLJ44846, FLJ46044, HDHD2B, hLHPP, lhpp, LHPP_HUMAN, Phospholysine phosphohistidine inorganic pyrophosphate phosphatase  纯度 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
BBEAgar  EPHA6重组小鼠 EphA6 / EHK-2 蛋白 (His 标签) Protein
赖氨酸铁琼脂(LIA) Lysine Iron Agar 250 用于食品中沙门氏菌生化试验(FDA标准)  CCL14/HCC-1(C-C motif chemokine 14 0.5mgCCL14/HCC-1(C-C motif chemokine 14) 嗜酸粒细胞趋化蛋白14抗原
弧菌显色培养基l/瓶用于弧菌快速检测，副溶血性弧菌显蓝色，菌显红色incubationmedia弧菌显色培养基l/瓶用于弧菌快速检测，副溶血性弧菌显蓝色，菌显红色  UBE2I重组人 UBE2I 蛋白 Protein
品红亚琼脂(即用型) 100ml/瓶 用于饮用水，水源水中总大肠菌群的选择性分离和确证  CCL14 Protein Human 重组人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (His 标签)
啶酮酸(5.0mg)5.0mg/支*5  CD276 Protein Rat 重组大鼠 B7-H3 / CD276 蛋白 (Fc 标签)
BBL琼脂培养基 BBL Agar Medium 用于双岐杆菌分离培养(GB标准)  EPHA4重组小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (His 标签) Protein
梭菌培养基 Clostridium Enrichment Medium 250克 用于梭菌增菌培养  Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原 0.5mgApelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原
胱氨酸乳糖无电解质培养基250g/瓶无抑制性，用于泌尿系统致病菌的分离和培养，也可做深部培养的贮运incubationmedia胱氨酸乳糖无电解质培养基250g/瓶无抑制性，用于泌尿系统致病菌的分离和培养，也可做深部培养的贮运  MFGE8重组人 MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 蛋白 (His 标签) Protein
M-肠道菌琼脂 250g 用于水中或其它物质中肠球菌分离培养和计数(滤膜法或划线法)  CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 标签)
YPDA培养基250g用于酵母菌增菌培养  CD70 Protein Rat 重组大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 标签)
BBL琼脂培养基基础 250(g) incubation media BBL琼脂培养基基础 250(g)  XCL1重组小鼠 XCL1 蛋白 (His 标签) Protein
CLED培养基添加剂 CLED Medium Supplement 1毫升×5支 加入100mlC.L.E.D培养基中  白介素2(IL2)重组蛋白 Recombinant Interleukin 2 (IL2)
萘啶酮酸4.5mg*5添加于225mlHB4成LBubationmedia萘啶酮酸4.5mg*5添加于225mlHB4成LB1  CKB重组人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白 (His 标签) Protein
PeptoneSaltSolution  CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 标签)
Camp-BAPAgarBase,Modified  IL2RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL2RA 蛋白
BCPMediumwith0.2%SolubleStarch  NTRK1重组大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签) Protein
TPY琼脂培养基 TPY medium 250 用于双歧杆菌分离培养(GB标准)  DR3/TRAMP (death receptor-3 0.5mgDR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受体(抗原)
LPM琼脂基础250g/瓶用于李斯特氏菌选择性分离，每培养基中添加incubationmediaLPM琼脂基础250g/瓶用于李斯特氏菌选择性分离，每培养基中添加1414  CTNNB1重组人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 标签) Protein
Amies运送培养基管 20支/包 用于致病菌标本的运送保存  CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 标签)
MIOMedium  CD36 Protein Mouse 重组小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 (His 标签)
BCPMediumwith0.2%SolubleStarch  HA重组甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein
Recombinant Human LHPP甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础(MYP) Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 250 用于蜡样芽孢杆菌的固体平板计数(GB.SN标准)  rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein 100ugrHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein) 重组乙肝病毒e抗原
Stuart运送培养基250g/瓶用于致病菌标本的采集、运输和保存incubationmediaStuart运送培养基250g/瓶用于致病菌标本的采集、运输和保存  VNN1重组人 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (His 标签) Protein
BloodAgarPlates  CCL16 Protein Human 重组人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 标签)
en80-CornMeatAgarMediun  GZMH Protein Human 重组人 Granzyme H 蛋白 (His 标签)
重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：

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