Recombinant Human IGFBP1

商品属性：

货号	XG-DB2324	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	26-259
分子量	25.6 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：AFBP, Alpha pregnancy associated endometrial globulin, Amniotic fluid binding protein, Binding protein 25, Binding protein 26, Binding protein 28, Growth hormone independent binding protein, hIGFBP 1, hIGFBP1, IBP 1, IBP-1, IBP1, IBP1_HUMAN, IGF binding protein 1, IGF BP25, IGF-binding protein 1, IGFBP 1, IGFBP-1, IGFBP1, Insulin like growth factor binding protein 1  纯度 Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
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膜醭毕赤酵母 模式菌株 支/瓶  DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mgDISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原
月桂基盐胰蛋白胨MUG培养基250g用于O测，不含MUG(SN标准)  GALK1重组人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 标签) Protein
支原体肉汤培养基 250g 用于培养支原体的基础培养基  CYB5R1 Protein Human 重组人 CYB5R1 蛋白 (His 标签)
头孢磺啶(MUGal肉汤冻干配套试剂)SR005mg/支x添加于(02205MUGal肉汤。  TNFRSF14 Protein Mouse 重组小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 标签)
LAB-LEMCO( ) 肉汤 Lab-Lemco Broth Oxoid 500g incubation media LAB-LEMCO( ) 肉汤 Lab-Lemco Broth Oxoid 500g  FCGR2B重组食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His 标签) Protein
明亮发光杆菌 支/瓶  MT-II(Melanotan II Acetate 1gMT-II(Melanotan II Acetate) 醋酸美拉诺坦II
SorbitolMacConkeyAgarAdditives  IL9重组人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 (His 标签) Protein
PPLOBroth  CYGB Protein Human 重组人 Cytoglobin / CYGB 蛋白 (His 标签)
Doubleanti-chocolateagar  AKT3 Protein Mouse 重组小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 标签)
Lactose broth 乳糖肉汤 1.07661.0500 MERCK默克 incubation media Lactose broth 乳糖肉汤 1.07661.0500 MERCK默克  TFPI2重组小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白 (Fc 标签) Protein
甘露醇氯琼脂培养基 250g 用于球菌的选择性分离培养和计数(《中华人民共和国药典》2010年版)。  胆囊收缩素(CCK)重组蛋白 Recombinant Cholecystokinin (CCK)
SD大鼠脂肪间质干细胞成软骨诱导分化完全培养基SDratadiposemesenchymalstemcellsintochondrocytesinduceddifferentiationofcompletemedium  TNFRSF19重组人 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His 标签) Protein
AcidBorth  DAPK1 Protein Human 重组人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 标签)
甘露醇发酵培养基24030250g用于鉴别球菌发酵甘露醇试验(化妆品卫生规范微生物检验方法2007版)。  CTLA4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (Fc 标签)
Lambda Broth 培养基 100g incubation media Lambda Broth 培养基 100g  SERPINA6重组小鼠 SerpinA6 / CBG 蛋白 (His 标签) Protein
Recombinant Human IGFBP1芽孢杆菌 支/瓶  ACE( ACE, testis-specific isoform precursor 0.5mgACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管紧张素转换酶(抗原)
葡萄糖肉汤250g用于营养苛求菌培养和肠道菌产气实验  FKBP7重组人 PPIase / FKBP7 蛋白 (Fc 标签) Protein
无淀粉改良罗氏培养基 250g 用于结核杆菌分离培养  DAPK1 Protein Human 重组人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 标签)
胺蓝-DNA琼脂24025用于球菌的耐热核酸酶的试验。(SN02)。  LAMP1 Protein Rat 重组大鼠 LAMP1 / CD107a 蛋白 (Fc 标签)
重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：

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