Recombinant Human Hex

商品属性：

货号	XG-DB2211	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-270
分子量	29.6 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：Hematopoietically expressed homeobox, Hematopoietically-expressed homeobox protein HHEX, HEX, HHEX, HHEX_HUMAN, HMPH, Homeobox hematopoietically expressed, Homeobox protein HEX, Homeobox protein PRH, HOX11L PEN, PRH, PRHX, Proline rich homeodomain containing transcription factor  纯度 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
Reinforced Clostridial Medium incubation media Reinforced Clostridial Medium  IL10重组猫 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein
粗糙链孢霉 产庆大霉素 支/瓶  NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 细胞核因子或称k基因结合核因子(多肽抗原)
0.ptoneWater  TWF1重组人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein
抗生素检定培养基2号(高PH)(05药典) 250g 用于林克霉素，克林霉素等效价测定(05药典)  GALE Protein Human 重组人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白 (His 标签)
豆粉琼脂250g用于配制血琼脂、巧克力琼脂及亚碲酸盐琼脂  S100A8 Protein Mouse 重组小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白 (His 标签)
Reinforced clostridial medium(RCM)梭状芽孢杆菌加强培养基 1.05411.0500 MERCK默克 incubation media Reinforced clostridial medium(RCM)梭状芽孢杆菌加强培养基 1.05411.0500 MERCK默克  TNFRSF14重组小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
肠道菌增菌肉汤(EE) 250g 用于肠道菌的增菌培养  Camk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG 0.5mgCamk1g(Calcium/calmodulin dependent protein kinase IG) 钙/钙调蛋白依赖蛋白激酶IG抗原
恒河猴骨髓间质干细胞成骨诱导分化培养基BonemarrowmesenchymalstemcellsintoGangesRIvermonkeyboneinductionanddifferentiationculturemedium  CYB5R1重组人 CYB5R1 蛋白 (His 标签) Protein
改良缓冲蛋白胨水(MBP) 250g 用于单增李氏菌前增菌培养(SN标准)  GALK1 Protein Human 重组人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 标签)
气单胞菌培养基基础250g用于气单胞菌分离培养  SIRPA Protein Rat 重组大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白 (His 标签)
Rogosa agar Lactobacillus selective agar Rogosa琼脂/乳酸菌选择琼脂 1.05413.0500 MERCK默克 incubation media Rogosa agar Lactobacillus selective agar Rogosa琼脂/乳酸菌选择琼脂 1.05413.0500 MERCK默克  ROR1重组人 ROR1 蛋白 (aa 453-783, His & GST 标签) Protein
改良CCD琼脂基础 250g 用于空肠弯曲菌的选择分离培养(GB、ISO)，每100mL基础培养基需添加1支配套试剂  solute carrier family 1 溶质携带物家族-1(抗原 0.5mgsolute carrier family 1 溶质携带物家族-1(抗原)
缓冲蛋白胨水(BPW)225ml/袋*阪崎杆菌前增菌培养(GB标准)  SPP1重组人 Osteopontin / SPP1 / ETA-1 蛋白 (His 标签) Protein
脑-心浸萃琼脂培养基 250g 用于粪链球菌的化培养  GALNT10 Protein Human 重组人 GALNT10 / GalNAc-T10 蛋白 (His 标签)
双歧杆菌琼脂培养基(BBL琼脂培养基)27330250g用于双歧杆菌的平板计数  PDCD1LG2 Protein Human 重组人 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His & Fc 标签)
Rogosa 琼脂 (CM0627) Oxoid incubation media Rogosa 琼脂 (CM0627) Oxoid  TF重组野猪 Transferrin / TF 蛋白 (Fc 标签) Protein
Recombinant Human Hex头状丝孢酵母 模式菌株，产核霉素。 支/瓶  ompF(putative outer membrane porin F protein 0.5mgompF(putative outer membrane porin F protein) 小肠结肠炎耶尔森氏菌膜通道蛋白抗原
大肠菌群快检纸片(水质)5份/包用于水质检验  TNFRSF10A重组人 TRAIL R1 / CD261 / TNFRSF10A 蛋白 (Fc 标签) Protein
碱性胆盐琼脂 250g 用于分离菌  GALNT2 Protein Human 重组人 GALNT2 / GalNAc-T2 蛋白 (His 标签)
AeromonasMediumBase(Ryan)  PKM Protein Mouse 重组小鼠 PKM2 / OIP3 蛋白 (His 标签)
重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：