Recombinant Human GMPR2

● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：
商品属性：

货号	XG-DB2127	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-348
分子量	38.2 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：1810008P16Rik, 5730544D12Rik, AA959850, GMP reductase 2, GMPR2, GMPR2_HUMAN, Guanosine 5' monophosphate oxidoreductase 2, Guanosine 5''-monophosphate oxidoreductase 2, Guanosine monophosphate reductase 2, MGC108877, MGC15084  纯度 Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
阪崎肠杆菌显色培养基 200g/瓶 incubation media 阪崎肠杆菌显色培养基 200g/瓶  CD86重组大鼠 CD86 / B7-2 蛋白 (His 标签) Protein
弧菌显色培养基选择性添加剂冻干试剂 10支 每支添加于100ml(CRM008)弧菌显色培养基中。  HIV gp120 艾滋病病毒(抗原 0.5mgHIV gp120 艾滋病病毒(抗原)
增菌肉汤培养基EEnrichmentbrothmediumE用于肠杆菌科细菌的增菌培养  HSPD1重组人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 标签) Protein
MRS琼脂 250g 用于食品中乳酸菌的分离培养或计数。  IL27 Protein Human 重组人 IL27 / Interleukin-27 蛋白 (His 标签)
Mueller-Hinton琼脂(MHA)250g用于弯曲杆菌的药物敏感性试验  HDAC8 Protein Mouse 重组小鼠 HDAC8 / HDACL1 蛋白 (His 标签)
阪崎杆菌显色培养基 Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium 用于阪崎杆菌的显色培养，阪崎杆菌显蓝色，其它肠杆菌显无色  CLMP重组大鼠 ASAM / CLMP 蛋白 (His 标签) Protein
EB增菌液 EB Enrichment Broth 250 用于单增李氏菌选择性增菌培养(SN标准)  GFRA4 ( Persephin receptor 0.5mgGFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受体α-4(抗原)
我妻氏血琼脂基础250g/瓶用于副溶血性弧菌神奈川试验，每培养基中需添加5ml5070ubationmedia我妻氏血琼脂基础250g/瓶用于副溶血性弧菌神奈川试验，每培养基中需添加5ml50701  SORCS1重组人 SorCS1 蛋白 (His 标签) Protein
LactosePeptoneBroth  IL2RG Protein Human 重组人 IL2RG / CD132 蛋白 (Fc 标签)
真菌培养基250g用于药品，生物制品霉菌无菌试验(GB标准)  IL2RA Protein Mouse 重组小鼠 IL2RA / CD25 蛋白 (His 标签)
半固体布氏肉汤(含0.18%琼脂) 250(g) incubation media 半固体布氏肉汤(含0.18%琼脂) 250(g)  ARSA重组小鼠 Arylsulfatase A / ARSA 蛋白 (His 标签) Protein
BS琼脂 Bismuth Sulfite Agar 250克 用于食品中沙门氏菌的检验  c-Myc tag c-Myc tag标签多肽 0.5mgc-Myc tag c-Myc tag标签多肽
我妻氏培养基基础250用于神奈川现象试验(SN标准)incubationmedia我妻氏培养基基础250用于神奈川现象试验(SN标准)  YWHAH重组人 14-3-3 eta / YWHAH 蛋白 (GST 标签) Protein
Iodinesolution  IL2RG Protein Human 重组人 IL2RG / CD132 蛋白 (His 标签)
ClostridiumenrichmentMedium  RTN4R Protein Mouse 重组小鼠 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白 (His 标签)
半固体动力培养基 250(g) incubation media 半固体动力培养基 250(g)  GB重组巨细胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 (His 标签) Protein
2×YT肉汤 2×YT Medium Broth 250克 BR  TM(Thrombomodulin 0.5mgTM(Thrombomodulin) 血栓调节蛋白多肽
碘伏(液体)500g杆菌检测用配套试剂incubationmedia碘伏(液体)500g杆菌检测用配套试剂  PARP1重组人 PARP-1 / PARP 蛋白 (His 标签) Protein
改良甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础 250g 用于蜡样芽孢杆菌分离培养和计数  IL3 Protein Human 重组人 IL3 / IL-3 蛋白
商业无菌检验培养基  HAVCR1 Protein Human 重组人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白
半固体动力培养基 Motility Test Medium(Semisolid) 用于动力观察，菌种保存，H抗原位相变异试验等(SN标准)  YWHAE重组小鼠 14-3-3 epsilon / YWHAE 蛋白 (GST 标签) Protein
Recombinant Human GMPR2GAM琼脂 Anaerobic Agar 250克 用于梭菌和其他厌氧菌的分离培养  2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid 5mg2,4-D/KLH(2,4-Dichlorophenoxyacetic acid) 2，4-二氯苯氧乙酸偶联血蓝蛋白
EMJH培养基250g/瓶用于钩端螺旋体的增菌培养，每90ml培养基中添加260ubationmediaEMJH培养基250g/瓶用于钩端螺旋体的增菌培养，每90ml培养基中添加2601  NRG1重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD) Protein
脑心浸液琼脂(BHIA) 250g 用于营养苛求细菌的增菌培养  IL3 Protein Human 重组人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白 (His 标签)
改良Camp-BAP氏琼脂添加剂A添加于HB0243中  IL3 Protein Rat 重组大鼠 IL3 / interleukin 3 蛋白 (His 标签)