Recombinant Human GGPS1

商品属性：

货号	XG-DB2086	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-300
分子量	32.9 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：(2E, 6E)-farnesyl diphosphate synthase, Dimethylallyltranstransferase, Farnesyl diphosphate synthase, Farnesyltranstransferase, Geranylgeranyl diphosphate synthase, Geranylgeranyl diphosphate synthase 1, Geranylgeranyl pyrophosphate synthase, Geranylgeranyl pyrophosphate synthetase, Geranyltranstransferase, GGPP synthase, GGPP synthetase, GGPPS, GGPPS_HUMAN, GGPPS1, GGPPSase, GGPS1, OTTHUMP00000036073  纯度 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
改良frey氏培养基 250g 用于培养滑液支原体及其他禽支原体用。  ALDH4A1重组人 ALDH4A1 蛋白 Protein
胰蛋白胨大豆肉汤 Trypticase (Tryptic) Soy Broth 250 用于球菌的MPN测定，增菌培养，NaCl浓度可根据需要而调整(GB、SN标准)  SLC24A5 (solute carrier family 24, member 5 0.5mgSLC24A5 (solute carrier family 24, member 5) 可溶性载质转运蛋白SLC24A5(抗原)
MS培养基(糖)250g/瓶蔗糖，用于植物组织培养incubationmediaMS培养基(糖)250g/瓶蔗糖，用于植物组织培养  ESAM重组人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 (His 标签) Protein
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA) 300ml/袋*10 用于霉菌酵母菌计数  LPAL2 Protein Human 重组人 LPAL2 蛋白 (Fc 标签)
No.4AgarBase  CSF1R Protein Human 重组人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & Fc 标签)
改良GAM琼脂 250g 用于脆弱抑杆菌的分离培养  HA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin) 蛋白 (HA1+HA2, cleavage) (His 标签) Protein
多粘菌素B Polymyxin B 1.2mg/支*5 用1ml无菌水溶解后添加于100ml HB0256中  phospho-ERK1/MAPK-1/2(pThr183 + pTyr185 0.5mgphospho-ERK1/MAPK-1/2(pThr183 + pTyr185) 0酸化原活化蛋白激酶1/2抗原
四酸煌绿(TTB)增菌液基础TTB250g/瓶用于沙门氏菌选择性增菌，每培养基中添加03支203cubationmedia四酸煌绿(TTB)增菌液基础TTB250g/瓶用于沙门氏菌选择性增菌，每培养基中添加03支20316  PVRL1重组人 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (Fc 标签) Protein
OxfordAgarBase  LRG1 Protein Human 重组人 LRG1 蛋白
Voges-ProskauerSemisolidAgar  CTSB Protein Human 重组人 Cathepsin B / CTSB 蛋白 (His 标签)
改良GAM琼脂 250g 用于脆弱抑杆菌的分离培养  HA重组甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein
普通肉汤培养基 Broth Medium 250 用于球菌的增菌培养(SN标准)  P-cadherin(placental 0.5mgP-cadherin(placental) P-钙粘附分子抗原
incubationmedia  TREML2重组人 TREML2 / TLT2 蛋白 (His 标签) Protein
GNEnrichmentBroth  LRG1 Protein Human 重组人 LRG1 蛋白 (Fc 标签)
培养基250g用于试验  BSG Protein Human 重组人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白
改良GAM琼脂抑菌剂 1ml*5 加入HB8462改良GAM琼脂中  HA重组甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein
Recombinant Human GGPS1氯多粘菌素B肉汤基础(SCPB) Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 250 用于副溶血性弧菌选择性增菌培养，用前应无菌加入多粘菌素B(SN标准)  p-Caldesmon(phosphor-Ser789 0.5mgp-Caldesmon(phosphor-Ser789) 0酸化钙介质素抗原
5000ml/瓶incubationmedia5000ml/瓶  CEACAM5重组人 CEACAM5 / CD66e 蛋白 (His 标签) Protein
TrypticaseSoyPolymyxinBroth  LRG1 Protein Human 重组人 LRG1 蛋白 (His 标签)
四环素检定、厌氧亚盐还原杆菌、嗜热菌芽孢检验培养基  C2 Protein Human 重组人 C2 / Complement Component 2 蛋白 (Fc 标签)
重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：

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