Recombinant Human FGF8

商品属性：

货号	XG-DB1972	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	53-233
分子量	23.0 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：AIGF, Androgen induced growth factor, Androgen-induced growth factor, FGF 8, FGF-8, FGF-8b, FGF8, FGF8_HUMAN, Fibroblast growth factor 8, Fibroblast growth factor 8 (androgen induced), Fibroblast growth factor 8 precursor, HBGF 8, HBGF-8, HBGF8, Heparin-binding growth factor 8, HH6, KAL6  纯度 Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
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60g/L氯蛋白胨水(PW) 250g 用于副溶血性弧菌增菌培养。(SN 0173-92)  AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1 0.5mgAEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1) 脂肪细胞增强结合蛋白1
大鼠神经干细胞成星形胶质细胞诱导分化培养基Ratneuralstemcellsintoastrocytesinduceddifferentiationmedium  SHH重组人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 标签) Protein
BrothMedium  PHPT1 Protein Human 重组人 PHPT1 / PHP14 蛋白 (His 标签)
CompleteAgarMedium  CD83 Protein Rat 重组大鼠 CD83 蛋白 (Fc 标签)
0酸缓冲液pH7.2 缓冲液和溶液 500g incubation media 0酸缓冲液pH7.2 缓冲液和溶液 500g  NLGN1重组小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 蛋白 (His 标签) Protein
大球盖菇 棉花黄萎病菌。 支/瓶  补体成分7(C7)重组蛋白 Recombinant Complement Component 7 (C7)
平板计数琼脂平板(9cm)国际标准平板计数琼脂，含糖，用于细菌总数的测定  TNFRSF6B重组人 DCR3 / TNFRSF6B 蛋白 (Fc 标签) Protein
察氏琼脂 250g 用于青霉,曲霉鉴定及保存菌种用(GB标准)  PHPT1 Protein Human 重组人 PHPT1 / PHP14 蛋白 (His 标签)
DifferentiaClostridialAgar  CD86 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD86 / B7-2 蛋白 (Fc 标签)
0酸盐缓冲液(pH7.2) PBS broth 用于样品的稀释(GB2008标准)  IL1R1重组大鼠 IL1R1 / CD121a 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
杆菌 1ml 杆菌检测用配套试剂  HGV(Hepatitis G vivus 0.5mgHGV(Hepatitis G vivus) 庚型肝炎病毒(抗原)
沙堡琼脂培养基250g/瓶用于真菌杀灭试验incubationmedia沙堡琼脂培养基250g/瓶用于真菌杀灭试验  MAP2K2重组人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 蛋白 (GST 标签) Protein
水平板计数琼脂培养基 250g 用于饲料中细菌总数测定  PHYH Protein Human 重组人 PHYH 蛋白
PPLO肉汤250g用于培养支原体的基础培养基  SDF2 Protein Mouse 重组小鼠 SDF2 / SDF-2 蛋白 (His 标签)
0酸盐葡萄糖胨水培养基 250(g) incubation media 0酸盐葡萄糖胨水培养基 250(g)  CD83重组小鼠 CD83 / HB15 蛋白 (Fc 标签) Protein
Koser氏枸橼酸盐肉汤 100g 用于细菌的枸橼酸盐的试验。(SN 0196-92和GB/T4789.38-2008)  ISL LIM同源框蛋白1(ISL1)天然蛋白 Native Ischemia Modified Albumin (IMA)
Recombinant Human FGF8乳糖发酵培养基LactoseBroth用于大肠菌群发酵试验  VASN重组人 VASN / Vasorin 蛋白 (His 标签) Protein
NaClTryptoneBroth  PI3 Protein Human 重组人 PI3 / Elafin / WFDC14 蛋白 (His 标签)
TCBS琼脂250g用于致病性弧菌的选择性分离(GB、SN标准)  EFNA5 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)
重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：

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