Recombinant Human FBP1

● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：
商品属性：

货号	XG-DB1951	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-338
分子量	37.1 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：D-fructose-1,6-bisphosphate 1-phosphohydrolase 1; EC 3.1.3; EC 3.1.3.11; FBP; FBP1; FBPase 1; fructose-1,6-bisphosphatase 1; fructose-bisphosphatase 1; growth-inhibiting protein 17  纯度 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
马铃薯葡萄糖琼脂 (CM0139) Oxoid incubation media 马铃薯葡萄糖琼脂 (CM0139) Oxoid  COLEC10重组食蟹猴 COLEC10 蛋白 (Fc 标签) Protein
清酒乳杆菌清酒亚种 食用及饲料酵母 支/瓶  IFABP(Intestinal Fatty acid binding protein 0.5mgIFABP(Intestinal Fatty acid binding protein) 小肠型脂肪酸结合蛋白抗原
m-TGE肉汤250g用于奶制品中滤膜法细菌总数计数  PRSS3重组人 Trypsin-3 / PRSS3 蛋白 (His 标签) Protein
MaconkeyAgarMedium  PNLIP Protein Human 重组人 PNLIP 蛋白 (His 标签)
铁琼脂250g用于产细菌计数  LAMP2 Protein Mouse 重组小鼠 LAMP2 / CD107b 蛋白 (His 标签)
马铃薯葡萄糖琼脂 霉菌和酵母菌的培养及计数 500g incubation media 马铃薯葡萄糖琼脂 霉菌和酵母菌的培养及计数 500g  CD63重组野猪 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (Fc 标签) Protein
大丽花轮枝孢 快生型 支/瓶  OGP (Ostegenic Growth Peptide 0.5mgOGP (Ostegenic Growth Peptide) 成骨生长肽 (骨生长激素肽)(蛋白多肽)
RODAC接触皿(TSA)(6.5cm)用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测  TNFRSF11B重组人 Osteoprotegerin / TNFRSF11B 蛋白 (His 标签) Protein
AntibioticAgarNO.2  PNLIPRP1 Protein Human 重组人 PNLIPRP1 / PLRP1 蛋白 (His 标签)
Li-MupirocinMRSMedium,Modified  GAPDH Protein Mouse 重组小鼠 GAPDH 蛋白 (His 标签)
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA) Potato Dextrose Agar 用于霉菌,酵母菌计数(GB标准)  ACVRL1重组大鼠 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
蛋白胨C Peptonized milk 100克 BR  HSP-105 (heat sock protein-105 0.5mgHSP-105 (heat sock protein-105) 热休克蛋白HSP105抗原
黄豆粉液体培养基250g/瓶用于杆菌的培养incubationmedia黄豆粉液体培养基250g/瓶用于杆菌的培养  IL4重组人 IL4 / Interleukin-4 蛋白 Protein
葡萄糖琼脂 250g 用于细菌的综合生化试验  PNLIPRP2 Protein Human 重组人 Galactolipase / PNLIPRP2 蛋白 (His 标签)
ListeriaEnrichmentBrothBase  PDCD1LG2 Protein Mouse 重组小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白 (His 标签)
马铃薯葡萄糖琼脂(含氯霉素) Potato Dextrose Agar(Chloramphenicol) 用于霉菌、酵母菌计数  CXCL16重组小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 标签) Protein
胰示肉汤基础 Tryptose Broth Base 250克 用于肺炎链球菌、菌细菌的培养  CD10/CALLA (Neutral Endopeptidase 0.5mgCD10/CALLA (Neutral Endopeptidase) CD10抗原
脒多粘菌素琼脂基础PAP250g/瓶用于杆菌分离培养，每培养基中添加2支22和2ml5070ubationmedia脒多粘菌素琼脂基础PAP250g/瓶用于杆菌分离培养，每培养基中添加2支22和2ml50701  MERTK重组人 MERTK / Mer 蛋白 GST 标签 Protein
Recombinant Human FBP1双料月桂基盐胰蛋白胨肉汤(LST) 250g 用于大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB、SN标准)  PNP Protein Human 重组人 Purine nucleoside phosphorylase / PNP 蛋白 (His 标签)
液体硫乙醇酸盐培养基250g用于药品，生物制品无菌试验，培养菌、厌气菌(GB标准)  CLEC2D Protein Rat 重组大鼠 CLEC2D / OCIL 蛋白 (Fc 标签)

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