Recombinant Human EXOSC3

● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：
商品属性：

货号	XG-DB1920	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-188
分子量	40.5 kDa	标签	N-terminal His-IF2DI Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：bA3J10.7, CGI 102, CGI-102, Exosome complex component RRP40, Exosome complex exonuclease RRP40, Exosome component 3, hRrp 40, hRrp-40, hRrp40, hRrp40p, p10, PCH1B, Ribosomal RNA processing protein 40, Ribosomal RNA-processing protein 40, S. cerevisiae, homolog of, RP11-3J10.8, RRP 40, Rrp40, Rrp40p  纯度 Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
牛津琼脂(OXA)基础 Oxford Agar Base 用于单增李氏菌的选择性分离(SN标准)  CD63重组大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白 (His 标签) Protein
GAM肉汤 Anaerobic Broth 250克 用于专性厌氧菌培养  CXCL10/IP-10 CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗原 0.5mgCXCL10/IP-10 CXCL10趋化因子10/干扰素诱导蛋白10抗原
发根农杆菌培养基250g/瓶incubationmedia发根农杆菌培养基250g/瓶  CD93重组人 CD93 / C1QR1 蛋白 (His 标签) Protein
BrainHeartinfusionAgar  PTPMT1 Protein Human 重组人 PTPMT1 蛋白 (His 标签)
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)250g用于阪崎肠杆菌的选择性分离培养以及肠道菌的计数和鉴别(SN/T5)。  BSG Protein Mouse 重组小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 标签)
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BrilliantGreenLactoseBileBroth  DSC2重组人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 (His 标签) Protein
细菌L型分离琼脂 110g 用于L型细菌分离培养  PTPN12 Protein Human 重组人 PTPN12 蛋白
EC-MUG培养基28266用于多管发酵法测定生活饮用水及其水源水中的大肠埃希氏菌(GB/T5750.06)。  FIGF Protein Mouse 重组小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (His 标签)
牛奶琼脂 (CM0021) Oxoid incubation media 牛奶琼脂 (CM0021) Oxoid  IL6重组食蟹猴 / 恒河猴 IL6 / Interleukin-6 蛋白 Protein
木层孔菌 支/瓶  Matrixyl Acetate 五胜肽/美容肽—M肽 1gMatrixyl Acetate 五胜肽/美容肽—M肽
4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)0.0HB0ST-MUG)中，用于O  COQ7重组人 COQ7 蛋白 (His 标签) Protein
支原体肉汤培养基(不含琼脂和酚红) 250g 用于支原体的增菌培养  PTPN12 Protein Human 重组人 PTPN12 蛋白 (aa 1-355, His & GST 标签)
YNB培养基用于基因工程中酵母菌的发酵培养  PLAT Protein Mouse 重组小鼠 tPA / PLAT 蛋白 (Fc 标签)
牛肉浸粉(膏) incubation media 牛肉浸粉(膏)  CD14重组食蟹猴 CD14 蛋白 (His 标签) Protein
Recombinant Human EXOSC3副凝聚短状杆菌 产精氨酸脱羧酶 支/瓶  MAPKK2 原活化蛋白激酶激酶 0.5mgMAPKK2 原活化蛋白激酶激酶
Cary-Blair氏运送培养基管20支/包用于运送肠道致病菌标本  PDK1重组人 PDK-1 蛋白 (His 标签) Protein
氯硝胺18%甘油(DG18)琼脂 250g 用于蜂蜜中嗜渗酵母计数  PTPN2 Protein Human 重组人 PTPN2 / PTPT 蛋白
0.性美蓝染色液5ml*6支/盒用于酵母菌镜检染色。  CNTN2 Protein Mouse 重组小鼠 Contactin 2 / CNTN2 蛋白 (His 标签)

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