Recombinant Human DNTTIP1

● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：
商品属性：

货号	XG-DB1798	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-329
分子量	36.1 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：C20orf167, Deoxynucleotidyltransferase terminal interacting protein 1, Deoxynucleotidyltransferase terminal-interacting protein 1, dJ447F3.4, DNTTIP1, TdIF 1, TdIF1, TDIF1_HUMAN, TdT binding protein, TdT interacting factor 1, TdT-interacting factor 1, Terminal deoxynucleotidyltransferase interacting factor 1, Terminal deoxynucleotidyltransferase-interacting factor 1  纯度 Greater than 95% as determined by SDS-PAGE 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
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麦芽浸膏汤 Malt Extract Broth 200 用于酸性罐头食品商业无菌检验  p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810 0.5mgp-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810) 0酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗原
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TSI  TGFA Protein Human 重组人 TGFA / TGF-alpha 蛋白
MineralSaltsAgar  CD274 Protein Human 重组人 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 标签)
胰化大豆-坚牢绿琼脂(TSFA) 250(g) incubation media 胰化大豆-坚牢绿琼脂(TSFA) 250(g)  ERBB4重组大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (His 标签) Protein
细菌总数显色培养基配套平皿 Total Genes Chromogenic Medium Dish 9㎝/块  Cytomegalovirus (CMV 0.5mgCytomegalovirus (CMV)PP65 细胞巨化病毒(多肽)
M250用于牛奶和乳制品中乳酸菌检测和分离培养(Merck方法)incubationmediaM250用于牛奶和乳制品中乳酸菌检测和分离培养(Merck方法)  TLK2重组人 TLK2 / PKU-ALPHA 蛋白 (aa 397-772, His & GST 标签) Protein
庆大霉素(100IU)和亚碲酸(1mg)混合液 1ml*5支/盒 用于分离培养菌抑菌剂  TGFB1 Protein Human 重组人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白
真菌琼脂培养基250g用于无菌生长试验  CST3 Protein Mouse 重组小鼠 Cystatin C / CST3 蛋白 (His 标签)
胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础 250(g) incubation media 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础 250(g)  DPP4重组食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白 (Fc 标签) Protein
改良缓冲蛋白胨水 MBPW 250克 李氏菌的增殖  IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1 0.5mgIL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受体相关蛋白样1前体蛋白(抗原)
精氨酸葡萄糖斜面琼脂于菌的复合生化试验(SN标准)incubationmedia精氨酸葡萄糖斜面琼脂于菌的复合生化试验(SN标准)  SGK3重组人 SGK3 / SGKL 蛋白 (His & GST 标签) Protein
Recombinant Human DNTTIP1志贺氏菌显色培养基 1000ml 用于志贺氏菌显色培养  TGFBR1 Protein Human 重组人 TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 蛋白 (aa 200-503, His & GST 标签)
MFB培养基250g用于李斯特氏菌的选择性增菌培养  PROCR Protein Mouse 重组小鼠 Epcr / PROCR 蛋白 (Fc 标签)
胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础 Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定  IL17RD重组人 IL17RD 蛋白 (His 标签) Protein
葡萄球菌增菌肉汤 Staphylococcus Enrichment Broth 250克 凝固酶阳生葡萄球菌选择性增菌  双调蛋白(AREG)重组蛋白 Recombinant Amphiregulin (AREG)
NZYM肉汤250g/瓶不含酸水解酪蛋白，用于大肠杆菌菌株培养，配方被推荐用于重组l的复制incubationmediaNZYM肉汤250g/瓶不含酸水解酪蛋白，用于大肠杆菌菌株培养，配方被推荐用于重组l的复制  TPPP2重组人 TPPP2 蛋白 (His 标签) Protein
阪崎杆菌分离琼脂(ESIATM) 250g 用于阪崎肠杆菌分离培养  TGFBR1 Protein Human 重组人 TGFBR1 / ALK-5 / SKR4 蛋白 (His & Fc 标签)
PseudomonasAgarP  HA Protein H4N6 重组甲型流感 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)

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