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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Cynomolgus PAH Protein (His Tag)
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
100 µg/1 mg
| 规格: | 100 µg | 产品价格: | ¥5170.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1 mg | 产品价格: | ¥33640.0 |
蛋白名称:Cynomolgus PAH Protein (His Tag)
蛋白构建:A DNA sequence encoding the Cynomolgus PAH (A0A7N9DEA3) (Asp1-Lys437) was expressed, with a polyhistidine tag at the N-terminus.
表达宿主:HEK293 Cells
蛋白纯度:≥ 95 % as determined by SDS-PAGE.
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端:Met
蛋白分子量:The recombinant Cynomolgus PAH consisting of 456 amino acids and has a calculated molecular mass of 52.62 kDa. As a result of glycosylation, the recombinant protein migrates as an approximately 46.9 kDa protein in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:A0A7N9DEA3
蛋白氨基酸序列:Asp1-Lys437
蛋白标签:N-His
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文献和实验(图2): 利用Ni-NTA纯化QIAgenes载体表达的蛋白 QIAgenes表达载体N端带有His标签,可以利用Ni-NTA一步纯化得到高纯度蛋白。如果实验需要得到无标签蛋白,His标签可以利用TAGZyme system去除(图3)。 QIAgenes Expression Kits — Insect / Mammalia • 预制蛋白表达载体,专门针对35,000个人类基因所设计 • 合成全长、序列优化且经过验证的cDNA,cDNA免费克隆到表达载体 • 带有三种启动
His-tag 时,常遇到的问题是寄主蛋白与填料的非特异性结合,在哺乳动物重组蛋白的纯化过程中,这样的情况更为明显。由于系统中有很多含有组氨酸(histidine)的残基的蛋白,这种蛋白结构与 his-tag 相似,容易与镍柱结合,因此导致目标蛋白纯度降低[13]。FLAG-tag 系统可在非变性条件下进行纯化,能得到高纯度、有活性的蛋白,但其缺点为纯化介质较为不稳定,且纯化成本高上许多[5]。另一常用的标签为 GST-tag,一个 26kDa 的蛋白,其特点是表达量高,具高度抗原性,常用来增加目标
,或者可以表达以产生重组蛋白。pET-32α(+)载体系列用于表达与109 aa Trx•Tag™硫氧还蛋白融合的肽序列。它属于一种表达系统,可在其激活后产生所需的蛋白质。插入原核宿主细胞。原核细胞如大肠杆菌因为它们廉价,快速的生物量积累和简单的工艺规模扩大,因此是外源蛋白表达的首选宿主。在本文中,我们将重点总结这种在我们的实验室中使用的有用技术。表达后pET-32α(+)载体的构建,蛋白质表达和蛋白质纯化将在本文中详细描述。获得用于构建载体的外源DNA片段插入载体的DNA通常可以使用聚合酶链式反应(PCR
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