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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
U266人骨髓瘤细胞（GFP标记）
- 库存：
999
- 供应商：
上海圻明
- 细胞类型：
详见说明
- 组织来源：
详见说明
- 物种来源：
详见说明
- 细胞形态：
详见说明
- 运输方式：
常温/冷冻
- 生长状态：
详见说明
- 规格：
T/25*1瓶
欢迎光临圻明生物细胞专场，我们拥有上千种类齐全的细胞资源库，让广大科研工作者买的放心，用的省心！
U266人骨髓瘤细胞（GFP标记）哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时，可进行传代。
2)在生物安全柜内，打开培养瓶瓶口，收集瓶内的培养基；
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后，水平放置培养瓶，使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积，吸弃PBS；
4)向瓶内加入消化液1ml，浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min；
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起，若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中，将悬液吸入15ml离心管；
注：如还有部分细胞未消化下来，可采用分步消化：
① 准备一个无菌的15ml离心管，加入2ml含10%FBS的完全培养基；
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和（避免吹打）；
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右，轻拍培养瓶，95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和，中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min；
7)准备两个新的T-25培养瓶，各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后，弃上清，用2ml完全培养基重悬离心细胞，将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶，每个培养瓶各1ml；
9)水平放置培养瓶，震荡混匀后，将培养瓶置于37℃，5%CO2培养箱中静置培养。
冻存 （细胞冻存建议每瓶T25冻一支）
1）~6）参照传代步骤
7）离心完成后，弃上清，用1mL冻存液重悬细胞沉淀，然后转入1.8ml冻存管中；
8）将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中，之后转入-80℃冰箱中过夜降温；
9）第二天，取出降温完成的序降温盒中的冻存管，尽快转入液氮罐中保存。
产品仅供科研不用于诊断治疗等其他用途。欢迎新老客户咨询订购U266人骨髓瘤细胞（GFP标记）哪里买，其他相关产品
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文献和实验1975年Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞与和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合，形成的杂交瘤细胞既可产生抗体，又可无性繁殖，从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破使血清学的研究进入了一个高度精确的新纪元。 免疫细胞化学的 技术关键之一是制备特异性强、亲合力大、滴度高的特异性抗体，由于每种抗原都有几个抗原决定簇，用它免疫动物将产生对各个决定簇的抗体，即多克隆抗体。单克隆抗体则是由一个产生抗体的细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来
，PEG）的诱导下与同系动物的骨髓瘤细胞融合。首先是细胞质融合，然后通过有丝分裂细胞核合而为一，形成新的杂交细胞，简称为杂交瘤。细胞融合后移入HAT培养液中培养。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶（HGRPT），在HAT培养液中不能增殖而死亡。淋巴细胞培养中也不能长期在培养液中生长增殖。然而杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了HGPRT的基因产物，并从骨髓瘤细胞中获得肿瘤细胞不断生长繁殖（传代）的特性，因此在HAT培养液中选择性存活下来。细胞融合后既具有产生特异性抗体的能力。又保留了瘤细胞能体外
抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞 抗原，可取1×107个细胞 作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化，如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原，可将抗原所在的电泳条带切下，研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞 同源的BALB/c健康小鼠，鼠龄在8～12周，雌雄不限。为避免小鼠反应而不佳或免疫过程中死亡，可同时免疫3～4只小鼠。 免疫过程和方法与多克隆 抗血清制备基本
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