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- 英文名:
小鼠成骨细胞
- 库存:
999
- 供应商:
上海圻明
- 细胞类型:
详见说明
- 组织来源:
详见说明
- 物种来源:
详见说明
- 细胞形态:
详见说明
- 运输方式:
常温/冷冻
- 生长状态:
详见说明
- 规格:
T/25*1瓶
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小鼠成骨细胞哪里买传代建议一传二
1)当细胞汇合度达到85%以上时,可进行传代。
2)在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,收集瓶内的培养基;
3)向培养瓶内加入3ml无菌的1×PBS 后,水平放置培养瓶,使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积,吸弃PBS;
4)向瓶内加入消化液1ml,浸润底面后放入37℃ CO2培养箱中孵育1~2min;
5)孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2ml含10%FBS的完全培养基中,将悬液吸入15ml离心管;
注:如还有部分细胞未消化下来,可采用分步消化:
① 准备一个无菌的15ml离心管,加入2ml含10%FBS的完全培养基;
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和(避免吹打);
③ 向之前消化的培养瓶中加入1ml胰酶继续消化2min左右,轻拍培养瓶,95%左右细胞脱落后加入2ml含10%FBS的完全培养基中和,中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6)1000rpm离心5min;
7)准备两个新的T-25培养瓶,各加入4ml完全培养基。
8)离心完成后,弃上清,用2ml完全培养基重悬离心细胞,将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶,每个培养瓶各1ml;
9)水平放置培养瓶,震荡混匀后,将培养瓶置于37℃,5%CO2培养箱中静置培养。

冻存 (细胞冻存建议每瓶T25冻一支)
1)~6)参照传代步骤
7)离心完成后,弃上清,用1mL冻存液重悬细胞沉淀,然后转入1.8ml冻存管中;
8)将冻存管转入填充满异丙醇的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
9)第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。

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【求助】一个关于基因改造的问题,希望各位站友帮帮忙!祝各位国庆快乐!
。 问题一,是上面是通过什么方法进行基因改造的,望战友简单说说其过程是怎样的? 问题二,Runx2是一种成骨细胞的一种转录因子。是促进骨髓干细胞向成骨细胞分化和促进成骨 细胞特异蛋白的表达。问题是dn-Runx2是什么东西?它是生物或细胞本来就存在的,还是人为改造的呢?它的中文名应该叫什么? 问题表述的不好希望各位站友原谅,同时希望大家帮帮忙,祝大家国庆快乐! 原文:transgenic mice that overexpress Runx
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