赛默飞世尔Thermo Fisher PH值缓冲液 BUFF

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

X 的原液)。上样缓冲液包括如下组分: 密度成分，如甘油或蔗糖，增加样品粘度，确保样品沉入孔中。 盐，如 Tris-HCl，为样品创造良好的离子强度和 pH 值环境。高盐浓度的上样缓冲液会产生更大片或扭曲的条带以及污点。 金属螯合剂，如 EDTA，可阻止样品中的核酸酶降解核酸。 染料 为监测样品的上样、电泳进展和 pH 值变化提供了颜色指示。部分上样缓冲液可能包含多个染料，以便有效跟踪样品中不同大小分子的迁移。 通常，上样染料都是带负电荷的小分子，因此迁移方向与核酸相同。其中有的显示pH值颜色，上样

常用缓冲液配制－2

8.0 0.5% N-propyl gallate 90% Glycerol Store at 4oC   PM  Buffer* 100 ml 1 M PIPES (100 mM PIPES pH= 6.9) 2 ml 1 M MgSO4 , (2 mM MgSO4 ) 2 ml 0.5 M EGTA (1 mM EGTA,) distilled water to 900 ml adjust pH to 6.9 distilled water

一篇搞定 IP、co-IP 实验

液，比如 RIPA，虽然裂解剧烈，但是无法维持蛋白天然构象，会破坏互作蛋白对。 如果自配，建议采用温和系统，比如 NP40/Triton 0.1%-1%；SDS ≤0.1%，盐离子≤150 mM 记得要加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂 结合液---利于蛋白之间的相互结合，要考虑孵育（结合）顺序 如果抗体和 beads 先孵育，建议 选择 pH 8.2（更常用）或者 pH 5.0 如果选用纯抗原作为诱饵蛋白 X 去拉裂解液中的靶蛋白 Y，抗体和抗原的结合 buffer 选择中性PBS/TBS 如果诱饵蛋白 X