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文献和实验,比机械增加质粒或转染试剂更有效。 参考资料 1. Thermo Fisher Scientific. Lipofectamine™ 3000 Reagent Protocol. 2. Thermo Fisher Scientific. Lipofectamine™ 2000 Transfection Protocol. 3. Thermo Fisher Scientific. Lipofectamine™ RNAiMAX Transfection Guidance. 4. Promega.
介导的转染。了解外源基因进入的一般性方法,观测外源蛋白的表达(绿色荧光蛋白)。【试剂与仪器】 1 、胎牛血清。2 、双抗溶液(链霉素 100μg+ 青霉素 100 单位)。3 、DMEM 培养基。4 、转染试剂( LIPOFECTAMINE 2000 )。5 、细胞培养基( DMEM+10%NCS )。6 、PBS 。7、无血清培养基。8 .胰酶( Trypsin )。9 .培养皿,移液管,量筒,恒温水浴箱,离心机, 15ml 离心管,微量移液器,荧光显微镜和 CCD 。 【操作
RNAiMAX,将两者混合,室温下孵育10-20分钟。加入培养细胞中,在37°C孵育24-48小时。 Lipofectamine® RNAiMAX的价格约为:4315元/0.75 ml,7410元/1.5 ml。最新推出的0.1 ml小包装价格为738元。虽然目录价看上去贵一些,但实际用量较省(24孔板的每孔建议用量为1 μl),因此综合来看性价比较高。 如何对付百毒不侵的细胞——Neon转染系统 就普通的细胞系而言,传统的转染试剂大多都能实现高效的转染
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