Recombinant Human DDIT3

商品属性：

货号	XG-DB1752	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-169
分子量	39.8 kDa	标签	N-terminal His-IF2DI Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：C/EBP homologous protein, C/EBP Homology Protein, C/EBP zeta, C/EBP-homologous protein, C/EBP-homologous protein 10, CCAAT/enhancer binding protein homologous protein, CEBPZ, CHOP, CHOP 10, CHOP-10, CHOP10, DDIT 3, DDIT-3, Ddit3, DDIT3_HUMAN, DNA Damage Inducible Transcript 3, DNA damage-inducible transcript 3 protein, GADD 153, GADD153, Growth Arrest and DNA Damage Inducible Protein 153  纯度 Greater than 90% as determined by SDS-PAGE 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

重组蛋白的制备方法
重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
小鼠促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒    NA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性)
小鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒    NOG Protein Human 重组人 Noggin / NOG 蛋白 (His 标签)
小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)   作用：   ELISA       PELI1重组人 PELI1 / Pellino-1 蛋白 (His & GST 标签) Protein
小鼠白介素-13   英文名称：    ierleukin-13   规格：   48T/96T   英文缩写：   IL-13    IFNAR1重组小鼠 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 标签) Protein
小鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISAKit    Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase 0.5mgSmac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase) 线粒体促凋亡蛋白抗原
小鼠白细胞抑制因子 (mouse LIF)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D    MIF Protein Mouse 重组小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白 (His 标签)
小鼠β细胞素(BTC)ELISA试剂盒    PGK2 Protein Human 重组人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 (His 标签)
小鼠αL艾杜糖苷酸酶elisa试剂盒   小鼠αL艾杜糖苷酸酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠αL艾杜糖苷酸酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠αL艾杜糖苷酸酶试剂盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    CKM重组人 CKM / CK-MM 蛋白 (His 标签) Protein
小鼠肺表面活性物质相关蛋白D   英文名称：   Mouse Pulmonary surfacta associated protein type D   规格：   48T/96T   英文缩写：   SP-D    NRP1重组食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 标签) Protein
小鼠FMS样酪酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒    ZNF268 (zinc finger protein ZNF268 0.5mgZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1c) 人锌指脂蛋白-1c(抗原)
小鼠CD34(mouse CD34)   作用：   ELISA       M1 Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Matrix protein 1 / M1 蛋白 (His 标签)
小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽elisa试剂盒   小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽试剂盒、小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    PLBD2 Protein Human 重组人 PLBD2 蛋白 (His 标签)
线粒体呼吸链复合体Ⅳ活性测试盒   可见分光光度法   25管/24样    ANGPT4重组人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 标签) Protein
CXC 趋化因子受体 1(CXCR1)   作用：   ELISA       IL2RA重组食蟹猴 IL2RA 蛋白 (Fc 标签) Protein
无水碳酸钙   100g    胱天蛋白酶3(CASP3)重组蛋白 Recombinant Caspase 3 (CASP3)
胆碱酯酶（CHE）测定试剂盒（比色法）    LEP Protein Human 重组人 Leptin 蛋白
Recombinant Human DDIT3豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISAKit    CIB2 Protein Human 重组人 CIB2 / KIP-2 蛋白 (His 标签)
豚鼠单核细胞趋化蛋白4elisa试剂盒   豚鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠单核细胞趋化蛋白4试剂盒、豚鼠单核细胞趋化蛋白4eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。    B3GALTL重组人 B3GALTL 蛋白 (His 标签) Protein