Edman降解的设计方法

Edman降解（Edman degradation）是鉴定蛋白质一级结构的化学方法，是测定蛋白质、多肽或者氨基酸残基序列的一种技术。

 

通过预先完善Edman降解的设计方法可在一定程度上提升蛋白测序试验的成功率，是蛋白质测序过程中一个非常重要的步骤。Edman降解的具体设计方法主要分为以下几个部分。

 

蛋白质裂解过程：由于Edman降解法不能对超过60个氨基酸的肽段进行测序分析，因此，对于长肽段的测序，需要将长肽段裂解为氨基酸个数在Edman降解的测序范围内的短肽段。裂解过程可使用内肽酶（如胰蛋白酶或胃蛋白酶）或者化学试剂（如xiùhuàqíng）进行。之后依次对短肽段进行测序，通过片段间的重叠拼接整体蛋白质的序列信息。

 

Edman反应过程：可将待测序的蛋白质吸附到固体表面上，常见的一种固体基材是涂有聚丁二烯（一种阳离子聚合物）的玻璃纤维。将Edman试剂苯基异硫氰酸酯（PITC）与弱碱性缓冲溶液（pH=8.0-9.0，如12%三jiǎàn）一起添加到吸附的蛋白质中，与氨基酸N端的α游离氨基进行反应，形成末端残基的苯硫代氨基甲酰基（PTC）衍生物，即PTC-肽。

 

加酸裂解：即添加无水酸（如三fúyǐsuān）来选择性的分离N末端氨基酸，此时PTC衍生物发生异构化生成替代物苯基硫代乙内酰脲，通过洗脱替代物并进行色谱鉴定即可对得到的氨基酸残基进行检测。

 

蛋白质鉴定：重复以上化学反应循环，将每个循环中从蛋白质或肽段N末端释放出的氨基酸经过层析或高效液相色谱法（HPLC）检测，即可识别并鉴定所得氨基酸。

 

百泰派克生物科技采用岛津公司Edman测序系统，为广大科研工作者和科研客户提供基于Edman降解的蛋白质N端测序服务。采用我们的测序系统，可以测定N端30个氨基酸的序列信息。采用特定的蛋白上样系统，可以测定N端的60-70个氨基酸。百泰派克生物科技也建立了以先进的LC-MS/MS技术进行N-端测序的平台，可以测出封闭和修饰的蛋白质末端，与基于Edman降解的蛋白质N端测序形成互补，保证N端测序服务的顺利进行。

 

其他服务项目

 

优质检测平台

（1）基于生物化学、分子生物学、色谱的检测分析平台

该平台配备了Agilent 2100 生物分析仪、ProteinSimple凝胶成像系统、高效液相色谱系统，为蛋白质组学、代谢组学分析保驾护航，包括样品制备、分离纯化分子量测量、杂质表征表达研究等:

（2）基于质谱技术的蛋白质组学分析平台、代谢组学分析平台、蛋白测序平台

该平台配备了超高效液相色谱质谱联用，Orbitrap Fusion Lumos Tribri,Thermo Scientific Exploris以及氢气交换质谱仪配合机械臂为蛋白贡组学、代谢组学和蛋白测序提供了全面的分析手段，包括蛋白质和代谢物的分离、质谱分析、结构分析以及动态信息研究;

（3）生物药物表征平台

该平台配备了DSC-FTRR差示扫描量热仪与傅立叶变换拉曼光谱仪，氢气交换质谱仪配备机械臂，为生物药物表征提供了全面的分析手段，包括生物药物的分离、纯化、结构分析和动态信息研究:

（4）基于10x Genomics的单细胞分析平台

该平台能够完成基于10x Genomics单细胞分析平台的检测流程包括单细胞分选、cDNA合成、文库制备、文库质量检测、PCR扩增以及高通量测序;

（5）基于Fluidigm的单细胞质谱流式检测平台

采用基于Fluidigm Helios流式细胞仪(Mass Cytometry Systemfor Single Cell Analysis)用于单细胞质谱分析，该平台能够完成包括单细胞捕获、cDNA合成、实时定量PCR分析、目标区域扩增以及质谱流式细胞分析;

（6）基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台

基于高精度质谱的免疫多肽组学及免疫学检测平台，能够完成包括多肽分离、纯化、合成、质谱分析、免疫学检测以及分子相互作用研究;

（7）生信云平台

基于生物信息分析方法的生信云平台，能够完成一整套的生物信息学解决方案，包括组学数据的质量分析、差异表达分析、差异表达物GO、KEGG、COG注释分析、聚类分析、相互作用网络等多层次网络和通路的分析。

 

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司(Beiing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd.简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征，大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。

公司采用IS09001质量控制体系，zhuānyè提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;

获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;

业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;

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