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快递
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T25


PubMed=28842319; DOI=10.1016/j.jprot.2017.08.015
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Ghandi M., Huang F.W., Jane-Valbuena J., Kryukov G.V., Lo C.C., McDonald E.R. III, Barretina J.G., Gelfand E.T., Bielski C.M., Li H.-X., Hu K., Andreev-Drakhlin A.Y., Kim J., Hess J.M., Haas B.J., Aguet F., Weir B.A., Rothberg M.V., Paolella B.R., Lawrence M.S., Akbani R., Lu Y.-L., Tiv H.L., Gokhale P.C., de Weck A., Mansour A.A., Oh C., Shih J., Hadi K., Rosen Y., Bistline J., Venkatesan K., Reddy A., Sonkin D., Liu M., Lehar J., Korn J.M., Porter D.A., Jones M.D., Golji J., Caponigro G., Taylor J.E., Dunning C.M., Creech A.L., Warren A.C., McFarland J.M., Zamanighomi M., Kauffmann A., Stransky N., Imielinski M., Maruvka Y.E., Cherniack A.D., Tsherniak A., Vazquez F., Jaffe J.D., Lane A.A., Weinstock D.M., Johannessen C.M., Morrissey M.P., Stegmeier F., Schlegel R., Hahn W.C., Getz G., Mills G.B., Boehm J.S., Golub T.R., Garraway L.A., Sellers W.R.
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2)。 图2 使用BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi Kit得到>80%的靶定基因阻断 经Dicer酶切的,来源于β-半乳糖苷酶或者荧光素酶的dsRNA产生siRNA(d-siRNA)库,用来确定d-siRNA特异阻断基因活性的效果。GripTite™ 293 MSR 细胞共转染pcDNA™1.2/V5-GW/lacZ阳性对照质粒和pcDNA™5/FRT/luc,分别独自表达β-gal或者荧光素酶报告子,或者50ng luc 或者lacZ d-siRNA。对于每一种报告子
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性标记探针的检测 根据标记物的不同,非放射性标记探针原位杂交信号的显示方法也不同,如果用荧光素标记探针,杂交信号可直接在荧光显微镜下观察,如果用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记探针,原位杂交信号可用相应底物的酶促反应来显示。目前.常用非放射性标记物多为半抗原,以半抗原标记探针的原位杂交信号可通过免疫酶组织化学或亲和组织化学技术显示。如用生物素标记探针进行原位杂交,带有标记探针的杂交体可以根据亲和素―生物素亲和组织化学原理,或生物素―抗生物素抗体的免疫细胞化学原理进行检测。以地高辛标记
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