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- iCell（赛百慷）
- iCell-h011a
- 上海
- 2025年12月10日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
细胞系
- 细胞类型：
-
- 肿瘤类型：
肺癌
- 供应商：
镜像绮点
- 库存：
100
- 英文名：
A549-luc
- 生长状态：
贴壁培养
- 年限：
长期
- 运输方式：
冻存/复苏
- 器官来源：
肺
- 是否是肿瘤细胞：
-
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 免疫类型：
否
- 物种来源：
组织
- 相关疾病：
肺癌
- 组织来源：
肺
- 规格：
T25
细胞介绍
该细胞系由D.J.Griad通过肺癌组织移植培养建系，患者为58岁白人男性。A549能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成含有高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
细胞特性
1） 来源：肺癌
2） 形态：上皮细胞样，多角形；贴壁生长
3） 含量：>1x106 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5） 用途：仅供科研使用
细胞筛选
该细胞为稳定转染Luc的细胞，随细胞传代次数的增加，其Luc荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。
建议收到细胞后至少传3代，冻存留种后再进行筛选。
初次进行细胞筛选时，建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养，若无细胞漂浮或者漂浮较少，即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选，以此类推，至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中，漂浮细胞大于60%，则停止筛选，换成正常培养基培养，至细胞密度约80%，可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖，可停止筛选，用不含药完全培养基正常培养。
细胞诱导构建实验步骤：
1. 转染 （1）将A549细胞接种6孔板，每孔细胞数约为1×105 个，
（2）第二天，细胞融合度为50%左右时用于病毒转染，
（3）加入1mL完全培养基，再加20 μL Luciferase过表达慢病毒，
（4）混匀后继续培养，
（5）12h后观察细胞状态，并更换为新鲜培养基，
（6）当细胞长满板底后，传代至T25培养瓶中。
2. 筛选：用嘌呤霉素4ug/mL抗性筛选6周，稳转细胞记作A549+Luc。
3. 体外荧光素酶活性检测
取A549细胞消化，离心，弃上清，加20μL细胞裂解液，再加100μL荧光素酶底物，检测发光情况。
|
发光值 |
|
|
阴性 |
105 |
|
实验组 |
18995 |
结果表明慢病毒感染A549细胞能稳定表达荧光素酶。
一．细胞培养准备培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备F-12K（推荐iCell-0007）培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
| 人巨核细胞白血病细胞 | DAMI | 1640+10%FBS+1%P/S | 悬浮+贴壁（少量）生长 |
| 人髓母细胞瘤细胞 | DAOY | MEM+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人Burkitt's淋巴瘤细胞 | DAUDI | 1640+10%FBS+1%P/S | 悬浮生长 |
| 人弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞 | DB | 1640+10%FBS +1%P/S | 悬浮生长 |
| 人结直肠腺癌细胞 | DLD-1 | 1640+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人肺癌细胞 | DMS 53 | Waymouth's MB 752/1 medium (Invitrogen, 11220-035)+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人小细胞肺癌细胞 | DMS 114 | 1640+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人前列腺癌细胞 | DU145 | MEM+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人乳腺上皮细胞 | DU4475 | 1640+10%FBS+1%P/S | 悬浮生长 |
| 人脐静脉细胞融合细胞 | EA.hy926 | DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S | 贴壁生长 |
| 人食管癌细胞 | Eca-109 | 1640+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人膀胱癌细胞 | ECV-304 | M199+15%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人膀胱癌细胞 | EJ-1[EJ1] | MEM+1% L-谷氨酰胺+1%NEAA+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人卵巢透明细胞癌细胞 | ES-2 | McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人腺癌细胞系 | F56 | DMEM+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人咽鳞癌细胞 | FADu | MEM+10%FBS+1%PS | 贴壁生长 |
| 人甲状腺癌细胞 | FTC-133 | 1640+10%FBS +1%P/S | 贴壁生长 |
| 人胆囊癌细胞 | GBC-SD | 1640+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
| 人胆囊癌细胞荧光素酶标记 | GBC-SD+LUC | 1640+10%FBS+1%P/S | 贴壁生长 |
业务范围
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